锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法

摘要

本发明的目的是提供一种修复植物伴矿景天组织培养的高频率植株再生技术，分别取修复植物伴矿景天的茎段、茎尖、叶片进行组织培养扩繁，同时分别建立了茎段、茎尖、叶片高频再生体系。由于繁殖时直接选取伴矿景天的茎段、茎尖、叶片，取材容易，拓宽了伴矿景天繁殖的取材范围，繁殖方法快速，高效，为生理生化、分子生物学研究提供了条件。本发明目的是通过分别建立茎尖、茎段或叶片的高频植株再生体系的方法，适宜用作体细胞突变体的筛选和微繁殖以及农杆菌介导法转基因转化材料，为阐述其重金属耐性和超富集的分子生物机理提供基础条件。

主权项

锌镉超积累植物伴矿景天的组织培养育苗方法，其特征是采用茎尖组织诱导分化法：将伴矿景天消毒后取带有腋芽的0.3～0.5cm茎段或茎尖，接种到诱导培养基上，所说的诱导培养基是含有(0.05～0.15)mg/L 6‑BA和(1.5～2.5)mg/L NAA的MS培养基，每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养20～40天后，取出长有簇生芽的茎尖，选取大芽，转接到壮苗培养基上，所说的壮苗培养基是1/2MS培养基，其中含有浓度为(0.1～0.5)mg/L 6‑BA、(1.5～2.0)mg/L NAA、5μmol/L Cd(NO3)2和(0.1～1.5)mg/L IBA，每天保持光强为3000勒克司的光照16小时的培养箱中培养3～8周，得到含有许多2～3cm长幼根的组培苗，然后将培养瓶移到室外，打开瓶口，浇灌蒸馏水放置2～3天后，用水洗去培养基，移栽至pH 6.0～8.0的全营养素有机质基质中，2～4周得到组培苗。