淡紫拟青霉抑制象耳豆根结线虫的测定方法

摘要

本发明涉及一种淡紫拟青霉抑制象耳豆根结线虫的测定方法，其可通过两种技术方案来实现，一种是采用淡紫拟青霉对象耳豆根结线虫卵孵化的抑制测定，另一种是淡紫拟青霉对象耳豆根结线虫2龄幼虫的抑制毒杀测定。本发明的优点在于：不仅能实现生物防治根结线虫，而且可避免对环境造成污染。

主权项

一种淡紫拟青霉抑制象耳豆根结线虫卵孵化的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)挑取纯化后的象耳豆根结线虫的卵囊，放入带盖的10mL离心管内，加入5mL0.5％NaClO，用力振荡3min，迅速将其通过双层筛，上层筛孔径为250μm，下层筛孔径为38μm，接着用无菌水收集冲洗下层筛中的卵粒；(2)单孢分离的淡紫拟青霉菌株在25℃下生长7d后，用直径为6mm的打孔器切取菌落边缘的菌块，将菌块置于PDA培养基平板中央，在菌块周围斜插上3块载玻片，每块载玻片上放置约50粒卵；设置一个对照，该对照是直接把卵粒放置在载玻片上后，置于PDA培养基中；各重复3次，然后把它们均置于25℃培养箱中；(3)分别在3d、7d和10d后取出载玻片镜检卵的孵化数，并通过计算卵的相对抑制率，同时每天观察卵被菌寄生的情况。