一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸的方法

摘要

本发明涉及一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法，属于生物转化技术领域。具体方法为：首先用可诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶的微生物分别在种子培养基和含有甘草酸的发酵培养基中培养诱导出相应的β-葡萄糖醛酸苷酶，然后微生物利用其诱导产生的酶特异性地裂解甘草酸分子结构中的末端糖苷键，生成GAMG，并分泌到发酵液中，再多次间歇补加底物甘草酸以及无机盐。该方法通过补加底物甘草酸及无机盐，既补充了营养物质，使得菌体能够在适宜的环境下生长，又促进了目的产物的合成；发酵结束后，GAMG产量达到13～24g/L，该方法可有效提高GAMG发酵产量，延长转化周期，提高设备利用率，降低产品生产成本。

主权项

一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸方法，其特征在于：具体步骤如下：步骤1、先将可诱导产生β 葡萄糖醛酸苷酶的微生物，接入到斜面培养基上，经培养后制得孢子悬液；步骤2、将步骤1所得的孢子悬液接入种子培养基中，经培养后得到种子液；步骤3、将步骤2所得的二级种子液接入到含有甘草酸的发酵培养基的发酵罐中，发酵培养，直到微生物被诱导出相应的β 葡萄糖醛酸苷酶，并开始特异性地裂解甘草酸分子结构中的末端糖苷键生成GAMG时，再多次间歇补加甘草酸以及无机盐；步骤4、发酵结束后可得到含GAMG的发酵液；经提取、纯化后得到GAMG。