一种益肾壮骨、补血益精中药复方制剂的含量检测方法

摘要

本发明公开了一种熟地黄、炒杜仲、枸杞子、女贞子、炒菟丝子、炒山药、茯苓、发酵虫草菌粉、莲子、芡实、煅牡蛎等十一味原料药组成的具有益肾壮骨、补血益精作用的中药复方制剂的含量检测方法。该方法包括枸杞子、发酵虫草菌粉的薄层鉴别，腺苷的含量测定，总钙量的测定以及砷盐检查；从多个方面反映所述中药复方制剂的质量。

主权项

一种原料药组成如下的具有益肾壮骨、补血益精作用的中药复方制剂的含量检测方法，熟地黄200‑600重量份，炒杜仲150‑450重量份，枸杞子150‑450重量份，女贞子150‑450重量份，炒菟丝子250‑750重量份，炒山药200‑600重量份，茯苓150‑450重量份，发酵虫草菌粉40‑120重量份，莲子125‑375重量份，芡实150‑450重量份，煅牡蛎55‑165重量份；所述中药复方制剂是指：取上述原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床上可以接受的任一种制剂，其特征在于所述含量检测方法如下：I、取相当于原料药52g的所述中药复方制剂，研细，加无水乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水10ml使溶解，放冷，加稀醋酸调pH至5‑6，用乙酸乙酯振摇提取2次，第一次15ml，第二次10ml，合并乙酸乙酯提取液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓缩至1ml，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl，对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3∶2∶1的乙酸乙酯‑三氯甲烷‑甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；II、取相当于原料药21g的所述中药复方制剂，研细，加50％乙醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取腺苷对照品，加50％乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一以0.1M磷酸氢二钠和0.5％羧甲基纤维素钠等体积混合为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以体积比为8∶2∶6∶0.3∶0.2的三氯甲烷‑乙酸乙酯‑异丙醇‑水‑浓氨溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；高效液相色谱法含量测定：色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为9∶1的pH＝6.5磷酸盐缓冲液‑甲醇为流动相，检测波长为260nm，理论塔板数按腺苷峰计算应不低于2000；其中所述pH＝6.5磷酸盐缓冲液由0.01mol/L磷酸二氢钠68.5ml与0.01mol/L磷酸氢二钠31.5ml混合得到；对照品溶液的制备：精密称取腺苷对照品适量，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备：取相当于原料药34g的所述中药复方制剂，研细，称取相当于原料药10g的细粉，精密称定，置具50ml容量瓶中，加90％甲醇适量，密塞，超声处理60分钟，放冷，加90％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml置水浴上蒸至近干，加流动 相溶解，移至25ml容量瓶，加流动相至刻度，摇匀，用孔径0.45μm的微孔滤膜滤过，取滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；相当于原料药3.44g的所述中药复方制剂含腺苷C10H13N5O4，不得少于0.16mg。