主权项 |
日本红枫的组织培养快繁方法,包括基本培养基、外植体的选取与灭菌、诱导培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽六个步骤,其特征在于:基本培养基和组培各阶段培养基由以下配方组成:1)基本培养基:以WPM为基本培养基,蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.8;2)诱导培养基:WPM+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L BA;3)增殖培养基:WPM+0.2mg/L TDZ+0.1mg/L BA;4)生根培养基:WPM+0.3mg/L IBA+0.32mg/L NAA;其中,外植体的选取与表面灭菌是:选取日本红枫实生苗的幼嫩枝,去叶,切取带有腋芽的茎段,经NaClO表面灭菌处理后,作为组培用的外植体;诱导培养是:无菌条件下将表面灭菌处理的茎段的切口变褐处切除,迅速将腋芽茎段的芽向上接种在诱导培养基上,在温度为25±2℃、光照14h/D、光照强度2500‑3000Lux下,诱导腋芽萌发,然后分化丛生芽,得到单株芽;增殖培养是:将单株芽接入增殖培养基中,在温度为25±2℃、光照14h/D、光照强度2500‑3000Lux条件下,每2月继代培养1次;生根培养是:将所得单株芽中2‑3cm以上的有效苗切割下来,除去周围的小芽及组织,接种到生根培养基中,在温度为22±2℃、光照8h/D、光照强度为2500‑3000Lux条件下培养1‑2周,得到组培苗;炼苗移栽是:当生根的组培苗生长到3‑5cm以上时,将培养罐开盖,进行炼苗1‑2周,炼苗后将组培苗上残留的培养基洗净,植入园土∶腐叶土∶砂土=2∶2∶1的培养土中。 |