一种稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因及其编码产物的体外功能检测的方法

摘要

本发明涉及一种稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因及其编码产物的体外功能检测的方法，属于植物保护和生物技术领域。本发明的技术方案是保持目前基因克隆与表达的方法，如引物设计、PCR扩增、real-time PCR、连接、转化、蛋白表达均与常规相同，不同的是该基因为稻瘟病菌侵染水稻后期高度表达的基因，与前人研究的稻瘟病菌基因多为稻瘟病菌侵染早期高度表达的基因有区别，其编码产物是小蛋白，由88个氨基酸组成，相对分子量为8.8kDa，其体外表达产物按照0.5mg/ml～2.5mg/ml的浓度直接接种到致伤的丽江新团黑谷水稻叶片后能引起水稻叶片产生病斑。本发明比传统稻瘟病菌致病性测定方法简便、快速。

主权项

一种稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因的编码产物的体外功能检测方法，应用目前现有技术中常用的基因克隆的与表达的方法，包括引物设计、PCR扩增、real‑time PCR、连接、转化、蛋白表达方法均与常规相同，该基因的体外表达产物按照0.5mg/ml～2.5mg/ml浓度直接接种到致伤的水稻叶片后引起水稻叶片致伤点周围产生褐色斑点，所述稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因的核酸序列为：ATGAAGTTCTCTGCCGCCCTTTTGACCACCATCACCGCCACCGGCGCCAACGCTCTCTGGTTCGTGCCGCCTCAATATACGACCAATCAACACCTCCAGACTTATTTCCGAGCCTATCCCGGGTGTGTTGCGCATTGCGAGACATGGTCTAAGTCCTCACAAGGCGGTAGAATGACAAACATCGCCACCATTCAAGCCAATTGCCAAGCCGAGTGCAACACAATCTTTGAAATTGGTCAATAA。