发明名称 | 一种提高小菘菜游离小孢子胚胎发生率的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种提高小菘菜游离小孢子胚胎发生率的方法。一种提高小菘菜游离小孢子胚胎发生率的方法,选取小菘菜单核靠边期的花蕾,消毒后分离纯化出小孢子,将纯化后的小孢子悬浮于高糖培养基中,调整小孢子的密度达到1×105~1×106个/ml,置于33℃-35℃下黑暗处理12h-24h,离心弃上清后,加入低糖培养基,获得小孢子悬浮液。小孢子悬浮液于黑暗处理10d-14d后即可出现肉眼可见的胚状体,将其置于振荡培养箱中培养,出现子叶型胚后立即放于光照下转绿,然后接到分化培养基上继代进而形成再生植株。通过本发明改良后的小孢子培养方法,使对常规培养没有反应的小菘菜品种产生了胚状体,诱导基因型成功率达到60%。 | ||
申请公布号 | CN102349443A | 申请公布日期 | 2012.02.15 |
申请号 | CN201110201936.7 | 申请日期 | 2011.07.19 |
申请人 | 南京农业大学 | 发明人 | 侯喜林;于文佳 |
分类号 | A01H4/00(2006.01)I | 主分类号 | A01H4/00(2006.01)I |
代理机构 | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人 | 徐冬涛;高原 |
主权项 | 一种提高小菘菜游离小孢子胚胎发生率的方法,其特征在于选取小菘菜单核靠边期的花蕾,消毒后分离纯化出小孢子,将纯化后的小孢子悬浮于高糖培养基中,调整小孢子的密度达到1×105~1×106个/ml,置于33℃~35℃下黑暗处理12h~24h,离心弃上清后,加入低糖培养基,获得小孢子悬浮液;其中,所述的高糖培养基是在1/2NLN培养基中加入15%~17%蔗糖及0.8mg/L~1.0mg/L秋水仙碱,再经0.22μm的微孔滤膜抽滤灭菌所得,pH为6.0;所述的低糖培养基是在1/2NLN培养基加入10~13%蔗糖及0.5~0.8g/L活性炭,再经0.22μm的微孔滤膜抽滤灭菌所得,pH为6.0。 | ||
地址 | 210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号 |