截短侧耳素产生菌的微量培养方法和其高产菌的高通量筛选方法

摘要

本发明提供一种截短侧耳素产生菌的微量培养方法，步骤如下：将截短侧耳素产生菌经培养后分离单菌落；配制固体发酵培养基高压灭菌后加入酶标板的各孔中，将截短侧耳素产生菌的单菌落菌丝体接种于酶标板中培养7-9天。本发明还提供截短侧耳素高产菌的高通量筛选方法，步骤如下：将经微量培养的截短侧耳素产生菌的酶标板孔中加入提取液提取，每孔吸取提取液进行转板，加入显色剂显色，用酶标仪测定并分析结果，得到筛选后的截短侧耳素高产菌。由于采用固体发酵，简化了种子培养这一步骤，发酵时间大大缩短。应用本发明的高通量筛选方法和普通的筛选方法相比相关系数良好，可知本发明的高通量筛选方法能应用于截短侧耳素高产菌的筛选。

主权项

一种截短侧耳素产生菌的微量培养方法，其特征在于：所述微量培养方法的步骤如下：1）、将截短侧耳素产生菌稀释成菌悬液，涂布于平板，培养后分离单菌落；2）、配制固体发酵培养基：以下为质量百分含量：葡萄糖5.7%、玉米浆4%、大豆油0.4%、MgSO40.04%、大豆蛋白胨1%、琼脂粉1.5%，其余为水；3）、将步骤2）中的固体发酵培养基高压灭菌后在无菌环境中将其加入酶标板，每孔加入量为孔体积的1/3‑2/3； 4）、将步骤1）中形成的截短侧耳素产生菌的单菌落菌丝体接种于步骤3）中制备的酶标板中，于25℃培养7‑9天，完成截短侧耳素产生菌的微量培养。