一种日本沼虾离体孵化的方法

摘要

本发明涉及一种日本沼虾受精卵离体孵化方法，其特点在于该方法包括亲虾的选取、交配产卵、孵化水的处理、剥卵、洗卵、孵化和日常管理等步骤。该发明所述的日本沼虾受精卵离体孵化的方法，克服了受精卵依赖母体孵化的生物学特性的难题，为日本沼虾的基因转移、细胞核移植等遗传操作奠定基础，填补了这一领域的研究空白，具有重要的实际应用价值。

主权项

一种日本沼虾受精卵离体孵化方法，其特征在于包括以下步骤：a.亲虾的选取：挑选发育良好、无病害、无伤残、体表无寄生物和营养状况良好的雌雄成虾作为亲虾，雌虾体长3cm‑6.0cm，头部背面充满生殖腺，颜色发绿；雄体体长5.0cm‑6.5cm，头部两侧可见白色生殖腺团；b.交配、产卵：将步骤a挑选的亲虾放在一起，观察雌雄虾交配现象，观察等待雌虾产卵，观察时间为1‑3天，在观察等待期间进行步骤c的操作，并将孵化装置准备好；c.孵化水处理：观察等待期间，将曝气24小时的自来水经活性炭过滤器过滤后加入孵化装置，加入量占孵化装置体积的3/4；d.剥卵：观察亲虾交配，母虾排卵后，用镊子从母体腹部逐个剥取尚处于受精期的虾卵，使其成为无纠结的单独个体；e.洗卵：用蒸馏水配制的8‰‑15‰的NaCl溶液，将步骤d中剥去的受精卵洗涤两次，洗涤后用8‰‑15‰的NaCl溶液浸泡受精卵5‑15分钟；f.孵化：将步骤e中洗卵后的受精卵放入已加入处理后孵化水的孵化装置，放入受精卵的数量为50‑1000颗，孵化装置放置在一水浴槽中，孵化装置底部装有曝气头，曝气头接进气管先后与空气泵和空气净化器连接，调节空气进入量，使得受精卵在水体中温和地翻动，水浴槽中水温控制在18‑30℃，孵化260‑650小时；g.日常管理：每隔22‑26小时彻底换取孵化水一次，换水前先停止气体进入，当所有受精卵沉淀至底部时，虹吸掉上部的水体，然后补充同等水温的新鲜孵化水。