一种快速构建水稻渗入系发掘优良基因的方法

摘要

本发明公开了一种快速构建水稻渗入系发掘优良基因的方法，该方法包括的一级混合池的构建是将每一块文库保存板中每一列中的16个孔内的单克隆菌液合并成一个一级混合池；二级混合池的构建是将每一块文库保存板所对应的一级混合池合并成一个二级混合池；三级混合池的构建是按二级混合池编号顺序从1号二级混合池开始，每10个二级混合池合并成为一个三级混合池；然后用常规转基因方法将各三级混合池中的混合克隆导入受体植物，获得渗入系。该方法节省了几万次转化手续，大幅度地减轻了科研人员的工作量，达到了简便、快速，可使该渗入系达到全基因组的插入，还能简便、快速和准确地查找到供体植物的优良基因定位，有利于供体优良基因的发掘利用。

主权项

1.一种快速构建水稻渗入系发掘优良基因的方法，包括如下步骤：构建BIBAC基因文库混合池：①一级混合池的构建待BIBAC基因文库的文库保存板中的单克隆菌液完全融化后，将每一块文库保存板中每一列中的16个孔内的单克隆菌液合并成一个一级混合池，将一级混合池标记为（X）-y， X为文库保存板的编号, X=1，2，3，……自然数，y为每一块文库保存板中列的编号，y=1，2，3，……自然数，该一级混合池命名为（X）-y 号一级混合池； ②二级混合池的构建将每一块文库保存板所对应的一级混合池合并成一个二级混合池，将二级混合池标记为X, X=1，2，3，……自然数，该二级混合池命名为X号二级混合池；X与文库保存板的编号相同； ③三级混合池的构建按二级混合池编号顺序从1号二级混合池开始，每10个二级混合池合并成为一个三级混合池，将三级混合池记为n，n =1，2，3，……自然数，该三级混合池命名为n 号三级混合池；用常规转基因方法分别将各三级混合池中的混合克隆导入受体植物，获得渗入系。