一种具己糖激酶抑制作用的活性成分的筛选方法

摘要

本发明属药物分析领域，涉及中药材中活性成分的筛选方法，具体涉及一种具己糖激酶抑制作用的中药活性成分的筛选方法。本发明基于以ATP为底物的己糖激酶催化反应，通过对ATP以及产物ADP的定量分析，筛选出中药材中具己糖激酶抑制作用的活性组分。本发明方法快速简便，经济有效。相比细胞试验，本发明提取物用量少，生化试剂节省且筛选周期短，对于中药材中活性组分的筛选和研究有重要意义。本发明中经优化的LC-MS中各项实验参数对于利用质谱技术测定其它类似性质的生物分子具有较好参考价值。

主权项

一种具己糖激酶抑制作用的中药活性成分的筛选方法，其特征在于，以ATP为底物的己糖激酶催化反应，通过对ATP以及产物ADP的定量分析，筛选出中药材中具己糖激酶抑制作用的活性组分，其包括步骤：(1)建立高效液相‑质谱联用方法(LC‑MS)，在流动相中添加5mM的醋酸铵，对ATP以及产物ADP检测及定量分析；(2)基于高效液相‑质谱联用方法对ATP进行定量分析，测定以ATP作为底物的己糖激酶活性；(3)对筛选得到的具己糖激酶抑制剂活性的中药提取物进行测定及计算。