一种来自蝎尾的纤溶活性蛋白及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种来自蝎尾的纤溶活性蛋白及其制备方法和应用，本发明的一种来自蝎尾的分子量为37.69kD纤溶活性蛋白其制备方法是：将蝎尾洗净，磨碎，加入磷酸钠缓冲液，4℃浸提过夜；离心去沉淀，分段盐析，取40％-70％部分；最后进行二乙氨基乙基-32纤维素离子交换层析柱纯化，用Tris-HCl缓冲液洗脱，收集活性蛋白峰，浓缩，冻干；本发明的纤溶活性蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用；发明涉及的纤溶活性蛋白是蝎尾中的一种单组分蛋白，易于纯化和批量制备，并且纤溶活性强，比活高，无毒性；分子量小、抗原反应低，是理想的抗肿瘤药物。

主权项

一种来自蝎尾的纤溶活性蛋白的制备方法，其特征在于如下步骤：1)将蝎尾洗净，磨碎，加入磷酸钠缓冲液，4℃浸提过夜；2)离心去沉淀，分段盐析，取40％‑70％部分；3)最后进行二乙氨基乙基‑32纤维素离子交换层析柱纯化，用Tris‑HCl缓冲液洗脱，收集活性蛋白峰，浓缩，冻干；所述步骤1)中缓冲液是pH7.2浓度为0.02mol/L的磷酸钠溶液，蝎尾重量与磷酸钠缓冲液体积之比为1∶5；所述步骤2)中分段盐析是，在上清液中加固体硫酸铵达40％饱和度，8500转/分，4℃离心泵中离心，收集上清液；再加入固体硫酸铵达70％饱和度，8500转/分，4℃离心泵中离心，收集沉淀；所述步骤3)中洗脱缓冲液是含有1mol/L氯化钠的0.02mol/L pH8.0的三羟甲基氨基甲烷‑盐酸。