一种益生元制剂的制备方法

摘要

一种益生元制剂的制备方法，属于农副产品资源开发、功能性食品添加剂和营养保健品技术领域。本发明采用三相卧螺法生产小麦淀粉副产物轻相液为主要原料，用黑曲霉菌种(Aspergillusniger)CICIMF0045(T)发酵麦麸产混合酶处理，经冷冻干燥后制得一种益生元制剂。本发明实现轻相液的资源化利用，利用好该轻相液是对三相卧螺工艺的一个重大的完善。该益生元制剂能够有效地促进肠道有益菌—乳酸杆菌的生长，从而抑制病原菌、腐败菌等有害菌的生长，进而净化肠道微环境。

主权项

一种益生元制剂的制备方法，其特征在于采用三相卧螺法生产小麦淀粉副产物轻相液为原料，所用酶为由黑曲霉( Aspergillus niger )CICIM  F0045（T）发酵麦麸制得的酶，益生元制剂的制备步骤为：（1）混合酶制备：发酵培养基的基本组成为NaNO3、麦麸和水，NaNO3:麦麸:水的W/W/V之比为 1:50:250；采用250mL摇瓶培养，培养基于115℃灭菌30min，冷却，以1.5%接种量接入黑曲霉菌种(Aspergillus niger)CICIM F0045(T)；32℃培养3～4d，之后用纱布过滤培养基，滤液4000r/min离心20min以脱除霉菌菌丝体；在滤液中加入(NH4)2SO4至质量终浓度为70%～85%，4℃下静置过夜，4000r/min离心30min，取沉淀物0.2g溶于pH5.2、20mL的0.2M的磷酸盐缓冲液，即制得混合酶溶液；（2）功能性低聚糖制备：取固形物含量为8%的轻相液500mL倒入烧杯中，用0.1M HCl调节其pH为5.0～6.0，加入步骤（1）制得的混合酶液2mL，酶解温度为50‑55℃，酶解时间为12～18h，得到酶解产物；（3）抗消化：将步骤（2）制得的酶解产物分散于含0.01M NaCl 的100mL pH6.9、 0.02M的磷酸盐缓冲液中，再加含20mg/L CaCl2的,0.25mL 1mM唾液淀粉酶，37℃水浴保温15min，用盐酸调节pH为2.0，加入含1mg/L NaCl的1.25mL 15.5mM胃蛋白酶，37℃水浴保温30min，用NaOH调节pH为6.9，加入含0.5mg/L NaCl的5mL 10mM胰酶的pH6.9、0.02M磷酸盐缓冲液，反应3h，得抗消化液；（4）样品干燥：将步骤（3）所得抗消化液在‑75℃超低温冰箱中冻藏12h，然后放入冷冻干燥机中真空冷冻干燥，在‑40℃，100Pa下干燥24h，即得冻干粉益生元制剂。