竹根姜脱毒组培种苗工厂化繁育方法

摘要

本发明公开了竹根姜脱毒组培种苗工厂化繁育方法，包括茎尖丛生芽诱导、丛生芽继代增殖、生根培养和试管苗移栽共四个步骤，分别对诱导培养基、增殖培养基、生根培养基和移栽基质等进行了优化，所得方法茎尖丛生芽诱导率高；丛生芽继代增殖倍数高且玻璃化率低；芽苗生根率达100％，根系健壮且有侧芽萌发；移栽成活率高，且芽苗健壮，生长快；本发明方法周期短，成本低，完全能满足竹根姜大面积规模化栽培的需要，具有良好的应用前景。

主权项

竹根姜脱毒组培种苗工厂化繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：a、茎尖丛生芽诱导：取竹根姜嫩芽，经消毒灭菌后，剥取茎尖作为外植体；将茎尖接种于诱导培养基在光照条件下进行丛生芽诱导培养，获得丛生芽；所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，并添加浓度为30g/L的蔗糖、浓度为6g/L的琼脂、浓度为2.0mg/L的6‑BA和浓度为0.1mg/L的NAA，pH为5.6～6.2；b、丛生芽继代增殖：将步骤a所得丛生芽转接至增殖培养基在光照条件下进行丛生芽继代增殖培养，获得继代增殖丛生芽；所述增殖培养基以MS·1/3NH4NO3培养基作为基本培养基，并添加浓度为30g/L的蔗糖、浓度为6g/L的琼脂、浓度为1.5mg/L的6‑BA和浓度为0.1mg/L的NAA，pH为5.6～6.2；所述MS·1/3NH4NO3培养基中硝酸铵的浓度为MS培养基中硝酸铵浓度的1/3，其余组分及其浓度与MS培养基相同；c、生根培养：当步骤b所得继代增殖丛生芽生长至3～4cm高时，将丛生芽切成单芽，转接至生根培养基在光照条件下进行生根培养，获得试管苗；所述生根培养基以1/2MS培养基作为基本培养基，并添加浓度为20g/L的蔗糖、浓度为6g/L的卡拉胶、浓度为0.5～1.0mg/L的6‑BA和浓度为0.2mg/L的NAA，pH为5.6～6.2；所述1/2MS培养基所含组分种类与MS培养基相同，但各组分的浓度仅为MS培养基中浓度的1/2；d、试管苗移栽：将步骤c所得试管苗移栽入体积比为3∶7的珍珠岩‑泥炭土混合基质中培养，即得脱毒组培种苗。