一种固相多肽合成蛋白溶菌素的制备方法

摘要

本发明公开了一种固相多肽合成蛋白溶菌素的制备方法，本发明的技术方案包括以下步骤：以RinkAmideMBHA树脂为起始原料，HBTU/HOBt为缩合剂，按照固相合成的方法依次连接具有Fmoc-保护基团的氨基酸，最后一个氨基酸使用Boc-Arg-OH·HCl，获得保护的十七肽树脂，然后加入切肽试剂进行切肽，加入乙醚沉淀，获得还原型粗品。5-位和14-位Cys的-SH基用Trt保护，并在pH为8.5～10.0的条件下用双氧水氧化；7-位和12-位Cys的-SH基用Acm保护，并在甲醇溶液中用碘氧化，获得双二硫键Cys5-14Cys7-12粗品，最后采用C8高效液相柱进行分离纯化，获得目标产物，纯度为99.21％，总收率为：23.68%。本发明的方法，生产成本低，工艺简单，环境污染低，产率高，便于工业化实施。

主权项

本发明是一种固相多肽合成蛋白溶菌素的制备方法，包括如下步骤：以Rink Amide MBHA树脂为起始原料，HBTU/HOBt为缩合剂，按照固相合成的方法依次连接具有Fmoc‑保护基团的氨基酸，最后一个氨基酸使用Boc‑Arg‑OH·HCl，获得保护的十七肽树脂，然后加入切肽试剂进行切肽，加入乙醚沉淀，获得还原型粗品;5‑位和14‑位Cys的‑SH基用Trt保护，并在pH为8.5～10.0的条件下用双氧水氧化；7‑位和12‑位Cys的‑SH基用Acm保护，并在甲醇溶液中用碘氧化，获得双二硫键Cys5‑14 Cys7‑12粗品，最后采用高效液相C8柱进行分离纯化，获得目标产物。