| 摘要 |
1. Способ крупномасштабного получения, выделения и очистки рчГ-КСФ, включающий в себя разрушение бактериальных клеток штамма-продуцента при выделении тел включения, предварительное удаление примесных белков, растворение тел включения, восстановление, ренатурацию, анионообменную и катионообменную хроматографические очистки рчГ-КСФ, отличающийся применением концентрирования культуральной жидкости, двукратной обработкой высоким давлением при разрушении клеток штамма-продуцента, получением обобщенного пула отмытых тел включения, солюбилизацией тел включения, а также применимыми к крупномасштабному получению подходами к ренатурации путем разбавления раствора белка и очистки рчГ-КСФ посредством хроматографии. ! 2. Способ по п.1, в котором в качестве штамма-продуцента используется штамм E.coli SGK25/pA3GF. ! 3. Способ по п.1, в котором конечный продукт содержит более 98% основного вещества по результатам гель-электрофореза в ПААГе. ! 4. Способ по п.1, в котором конечный продукт имеет гомогенность по ВЭЖХ более 97%. ! 5. Способ по п.1, в котором солюбилизации подвергаются тела включения массой от 20 до 340 г. ! 6. Способ по п.4, в котором стадия ренатурации проводится путем разбавления раствора белка до 400 л с длительностью 60-90 ч. ! 7. Способ по п.1, в котором анионообменная хроматографическая очистка осуществляется в колонках диаметром 17-30 см, с высотой слоя сорбента 7-20 см, с линейной скоростью нанесения 30-240 см/ч и линейной скоростью элюции 15-30 см/ч. ! 8. Способ по п.1, в котором очистка рчГ-КСФ включает анионообменную и катионообменную хроматографию. ! 9. Способ по п.1, в котором катионообменная хроматографическая очистка рчГ-КСФ включает ко |
