双标记核酸恒温扩增方法及检测试纸条

摘要

本发明公开一种双标记核酸恒温扩增方法及试纸条，该方法通过先合成内引物、外引物和环引物，用生物素和荧光素标记内引物或/和环引物，将标记引物加入LAMP反应体系中恒温扩增，得到双标记的核酸恒温扩增产物。试纸条包括支撑层、核酸扩增产物吸附层，核酸扩增产物吸附层粘贴于支撑层上，以生物素亲和蛋白及异硫氰酸荧光素抗体分别在纤维素层上印制检测印迹和对照印迹。本发明的试纸条检测特异性强、灵敏度高、速度快，既能直观检测LAMP扩增产物，又能克服胶体金检测试纸特异性相对较低的缺点，可广泛用于各种致病性微生物或病原体中特异性基因的检测。

主权项

一种双标记核酸恒温扩增方法，其特征在于：根据检测目标设计LAMP 引物，进行内引物、外引物和环引物的合成；用生物素和荧光素分别标记两种内引物，或分别标记两种环引物，或分别标记一种内引物和一种环引物，将标记引物加入LAMP反应体系中恒温扩增，得到双标记核酸恒温扩增产物。