羊胎素蛋白质及其制备方法

摘要

本发明涉及一种羊胚胎及羊胎盘生物制品及其制备方法。一种羊胎素蛋白质的制备方法，该方法包括以下的步骤:1）羊胚胎及羊胎盘原料前处理；2）羊胚胎及羊胎盘超微粉碎、细胞破壁；3）羊胚胎及羊胎盘的提取和酶解；4）采用葡聚糖凝胶层析法，根据分子量大小对上述步骤3）中得到的羊胎及羊胎盘素原液进行以下的分级精制制得羊胎素蛋白质。采用上述方法制得羊胎素蛋白质，使羊胎及羊胎盘的活性物质得到最大限度的保留，又便于人体全面吸收，工艺先进、合理，质量可控。

主权项

羊胎素蛋白质的制备方法，其特征在于该方法包括以下的步骤:1）羊胚胎及羊胎盘原料前处理：取羊胚胎及羊胎盘为原料，清洗，去除杂质，0～5℃低温下粉碎成粗粉；2）羊胚胎及羊胎盘超微粉碎、细胞破壁：将羊胚胎及羊胎盘粗粉低温‑40℃～‑50℃冷冻1～3h后，‑30～‑10℃超微粉碎，细胞破壁，达到0.1～10μm粒度；3）羊胚胎及羊胎盘的提取和酶解：细胞破壁后的羊胚胎及羊胎盘浆液加3～10倍蒸馏水温浸提取后过滤得滤液A和沉淀A，沉淀A采用蛋白酶酶解后抽滤得水解液B，合并滤液A和水解液B，得羊胚胎及羊胎盘素的精制羊胎素；4）采用葡聚糖凝胶层析法，根据分子量大小对上述步骤3）中得到的羊胎及羊胎盘素原液进行以下的分级精制：①分离氨基酸，分子量<700的多肽：羊胚胎及羊胎盘素的精制羊胎素上样，固定相Sephadex G‑10，依次用水，2%NaCl溶液洗脱，收集不同组分；②分离分子量1000‑5000的多肽：①中水洗脱液上样，固定相Sephadex G‑25，依次用水，0%‑2%NaCl溶液梯度洗脱，收集不同组分；③分离分子量5000‑30000的多肽：②中水洗脱液上样，固定相Sephadex G‑50，依次用水，0%‑2%NaCl溶液梯度洗脱，收集不同组分；④分离分子量30000‑150000的蛋白质：③中水洗脱液上样，固定相Sephadex G‑100，依次用水，0%‑2%NaCl溶液梯度洗脱，收集不同组分；⑤分离分子量150000‑600000的蛋白质：④中水洗脱液上样，固定相Sephadex G‑200，依次用水，0%‑2%NaCl溶液梯度洗脱，收集不同组分。