用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法

摘要

用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法，属于生物制药与工程领域。主要用于用发酵法生产的莫能霉素纯品(钠盐形式)的生产。包括砂土管菌种、斜面菌种、一级种子培养液、二级种子培养液、发酵液、滤饼、溶解释放、萃取、脱色，其特征在于：萃取采用含湿量为20％-30％的菌丝体，按重量比加入5-8倍的浓度为60-90％的甲醇，控制温度15-35℃，搅拌30-40分钟使充分溶解，再经活性炭脱色、过滤、结晶、分离、干燥、包装、制成成品。产品萃取率高：在90％以上；成本低、产品质量好：产品符合美国USP标准的莫能霉素钠纯品要求。经济效益高、可广泛应用于生物制药与工程工业领域。

主权项

用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法，其特征在于：具体工艺方法如下：(1)斜面菌种培养：挑取少量砂土管孢子接种于灭菌后的斜面培养基上，32℃培养240小时，然后在1‑6℃冰箱里保存；(2)一级种子和二级种子培养：将培养好的斜面菌种2支在无菌保护下接种于灭菌的500L一级种子培养基中，35℃培养26小时，然后通过蒸汽灭菌的无菌管道移入灭菌后的2000L二级种子培养基中，35℃培养24小时；(3)发酵培养：将二级种子培养液通过蒸汽灭菌的无菌管道移入灭菌后的25000L发酵培养基中，温度控制在35℃、pH控制在6.4‑6.8，培养325小时；(4)发酵液过滤分离：将发酵液用固体氢氧化钠调节PH至9.2，然后用板框进行固液分离、吹风，得到水分含量20‑30％的菌丝体滤饼；(5)溶解：称取200公斤水分含量为25％的滤饼，在搅拌下慢慢加入已放入1200L浓度为80％甲醇的溶解罐中，甲醇温度控制在25℃，搅拌30分钟，让滤饼里的莫能霉素充分释放到甲醇中，停搅拌，静置15分钟；(6)脱色：在脱色罐中加入6公斤针用活性炭，吸附脱色30分钟，然后过滤，得到脱色液1160L，脱色液收集到不锈钢结晶罐中；(7)结晶、分离：开启结晶罐搅拌，慢慢加入纯化水2500L，莫能霉素会慢慢以晶体形态析出，纯化水加完后继续搅拌60分钟，用烧杯取样观察结晶情况，确认已结晶完全，然后将结晶液用离心机进行分离，离心30分钟，得到莫能霉素湿晶体66公斤。(8)干燥、包装：将莫能霉素湿晶体吸入双锥干燥机中，真空度控制在‑0.07至‑0.09MPa，温度85‑95℃，干燥4.5小时，得到成品62.1公斤。