基于单碱基延伸反应进行基因多态性检测的方法

摘要

本发明公开了一种基于单碱基延伸反应进行基因多态性检测的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）根据待测基因序列设计并选取特异性引物；将特异性引物加入含有所测样本、双脱氧核苷酸三磷酸对（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷对（dNTP）的混合液中，进行单碱基延伸反应使特异性引物末端加入一个双脱氧核苷酸三磷酸对（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷对（dNTP）中的碱基；所述特异性引物位于待测基因SNP位点的上游，且引物的3′-末端碱基紧靠待测SNP位点，含有待测基因序列15～45个连续的核苷酸组成连续核苷酸序列；（2）测定延伸产物中剩余核糖核苷酸的量；根据延伸产物中剩余双脱氧核苷酸三磷酸（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷（dNTP）的多少判断该靶基因多态性的类型。该方法成本低、操作简便、不需复杂优化步骤即可快速检测基因多态性。

主权项

一种基于单碱基延伸反应进行基因多态性检测的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）根据待测基因序列设计并选取特异性引物；将特异性引物加入含有所测样本、双脱氧核苷酸三磷酸对（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷对（dNTP）的混合液中，进行单碱基延伸反应使特异性引物末端加入一个双脱氧核苷酸三磷酸对（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷对（dNTP）中的碱基；所述特异性引物位于待测基因SNP位点的上游，且引物的3′‑末端碱基紧靠待测SNP位点，含有待测基因序列15～45个连续的核苷酸组成连续核苷酸序列；（2）测定延伸产物中剩余核糖核苷酸的量；根据延伸产物中剩余双脱氧核苷酸三磷酸（ddNTP）或三磷酸脱氧核糖核苷（dNTP）的多少判断该靶基因多态性的类型。