发明名称 一种鸡胚培养及活体电转基因方法
摘要 本发明公开了一种鸡胚培养及活体电转基因方法,包括以下步骤:带壳培养,培养2天—3天时分别做带壳原位电转基因;去壳培养,将受精鸡蛋培养到第3天时,去壳置培养器皿放入恒温恒湿培养箱中培养;原位电转基因步骤,带壳培养2-3天将0.5μg/μl的质粒0.5-1μl用显微注射毛细玻璃针在体视显微镜下注射到脊髓或去壳培养5-6天注射到视顶部位,将电极放在已注射质粒的脊髓或视顶部位两侧,阳性电极在拟转基因一侧,进行电转;然后进行组织取材、包埋和切片。通过对传统培养方法的优化,建立鸡胚胎带壳和去壳培养技术,提高鸡胚培养成活率,为鸡胚活体原位电转基因提供了基础。
申请公布号 CN102321570A 申请公布日期 2012.01.18
申请号 CN201110241537.3 申请日期 2011.08.22
申请人 新乡医学院 发明人 林俊堂;杨慈清;王聪睿;毛会丽;李小英;石晓卫
分类号 C12N5/073(2010.01)I;C12N15/89(2006.01)I;C12N13/00(2006.01)I 主分类号 C12N5/073(2010.01)I
代理机构 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 代理人 陈浩;牛爱周
主权项 一种鸡胚培养及活体电转基因方法,其特征在于:包括以下步骤:带壳培养,培养2—3天时分别做带壳原位电转基因;去壳培养,将受精鸡蛋培养到第3天时,去壳置培养器皿放入恒温恒湿培养箱中培养;原位电转基因步骤,带壳培养2—3天将0.5μg/μl的质粒0.5—1μl用显微注射毛细玻璃针在体视显微镜下注射到脊髓或去壳培养5—6天注射到视顶部位,将电极放在已注射质粒的脊髓或视顶部位两侧,阳性电极在拟转基因一侧,进行电转;然后进行组织取材、包埋和切片。
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