一种SOD复合胶囊及其制备方法

摘要

本发明涉及一种SOD复合胶囊及其制备方法，所述SOD复合胶囊中含有白藜芦醇、辅酶Q10、鹅肝提取物、小麦胚芽提取物、红花提取物、苦荞提取物的重量比为10-50∶10-75∶75-150∶75-150∶200-500，每百克所述的复合胶囊中含有40000-4000000活力单位的超氧化物歧化酶，该超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。所述制备方法是：将葡萄皮、猪心、鹅肝、小麦、红花、苦荞、蝌蚪分别进行包括破碎、浓缩、离心分离、纯化等步骤的处理，获得各种原料的有效成分，再将蝌蚪提取物进行多次包埋，再与其他各个组分进行混合、制粒，即得成品。本发明具有抗氧化功能，可以缓解体力疲劳，增强人体免疫力。

主权项

一种SOD复合胶囊，其特征在于：所述复合胶囊中含有超氧化物歧化酶制剂、白藜芦醇、辅酶Q10、鹅肝提取物、小麦胚芽提取物、红花提取物、苦荞提取物，所述的胶囊中各个组分的重量比为： 白藜芦醇            10－50，辅酶Q10             10－75，鹅肝提取物           75－150，小麦胚芽提取物       75－150，红花提取物           75‑150，苦荞提取物           200‑500；每百克所述的复合胶囊中含有40000－4000000活力单位的超氧化物歧化酶，该超氧化物歧化酶制剂是修饰过的SOD复合酶蝌蚪冻干粉；所述超氧化物歧化酶制剂由下述制备方法获得：Ⅰ、超氧化物歧化酶的制备：A、按需要量取新鲜蝌蚪进行洁净处理然后进行灭菌处理； B、将灭菌处理后的蝌蚪混入海藻糖、维生素E后于‑20℃冷冻处理；所述蝌蚪、海藻糖、维生素E的重量比是：1：0.025：0.0001； C、将冷冻处理的蝌蚪破碎，加入磷酸钾缓冲液中进行匀浆处理，生成蝌蚪匀浆物，所述蝌蚪与磷酸钾缓冲液的重量比是1： 5；所述磷酸钾缓冲液的浓度是0.1mol/L、pH值7.6； D、将所述的蝌蚪匀浆物用氢氧化钠溶液调节pH值到7.0，进行超声破碎处理，生成蝌蚪超声破碎物；在0℃－4℃静置6－24小时；所述的超声破碎的时间为45分钟；E、向所述蝌蚪超声破碎物中加入鲜鸡蛋、无水乙醇，用氢氧化钠溶液调节pH值到7.6；在20℃－30℃条件下搅拌20－40分钟，静置30－60分钟，得到蝌蚪酶解液；所述蝌蚪超声破碎物、鲜鸡蛋、无水乙醇的体积比是9‑12：1.5‑2.5：4.5‑7.0；无水乙醇温度是‑10℃－‑20℃；F、对所述的蝌蚪酶解液进行多级沉淀分离处理，获得蝌蚪粗酶上清液；第一级处理包括：在所述的蝌蚪酶解液中加入该液体重量３０％的硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，收集上清液，即为蝌蚪酶解一级上清液；第二级处理包括：在蝌蚪酶解一级上清液中加入该液体重量４０％硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，收集上清液，即为蝌蚪酶解二级上清液；第三级处理包括：在蝌蚪酶解二级上清液中加入该液体重量5０％硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，收集上清液，即为蝌蚪酶解三级上清液；第四级处理包括：在蝌蚪酶解三级上清液中加入该液体重量6０％硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，收集上清液，即为蝌蚪酶解四级上清液；第五级处理包括：在蝌蚪酶解四级上清液中加入该液体重量7０％硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得蝌蚪粗酶上清液； G、将所述的蝌蚪粗酶上清液在95℃－100℃的水浴锅内快速升温到65℃－68℃，移出水浴锅静置降温到56℃－58℃，再移入水浴锅快速升温到65℃－68℃，移出水浴锅静置保温5－15分钟，快速冷却到15℃，然后进行离心分离处理，获得蝌蚪去杂蛋白上清液；H、将所述的蝌蚪去杂蛋白上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪一级SOD浓缩液； I、将所述的蝌蚪一级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪二级SOD浓缩液；所述蝌蚪一级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：4.5‑5.5，所述磷酸钾缓冲液的浓度是2.5mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃；  J、将所述的蝌蚪二级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪三级SOD浓缩液；所述蝌蚪二级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：2.5‑3.5，所述磷酸钾缓冲液的浓度是25mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃； K、将所述的蝌蚪三级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪四级SOD浓缩液；所述蝌蚪三级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：1.5‑2.5，所述磷酸钾缓冲液的浓度是50mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃；L、将所述的蝌蚪四级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪五级SOD浓缩液；所述蝌蚪四级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：0.8‑1.2，所述磷酸钾缓冲液的浓度是75mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃；M、将所述的蝌蚪五级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪六级SOD浓缩液；所述蝌蚪五级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：1.5‑2.5，所述磷酸钾缓冲液的浓度是50mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃；N、将所述的蝌蚪六级SOD浓缩液加入磷酸钾缓冲液中，经过离心分离处理获得上清液，对该上清液进行超滤浓缩处理，获得蝌蚪七级SOD浓缩液；所述六级SOD浓缩液与磷酸钾缓冲液的体积比是0.8‑1.2：2.5‑3.5，所述磷酸钾缓冲液的浓度是25mmol/L、pH值7.6；处理温度0℃－4℃；O、向所述的蝌蚪七级SOD浓缩液中，加入2.5‑3.5倍体积的、在0－4℃下预冷过的去离子水，初次离心处理得上清液；然后将该上清液中加入0.8‑1.2倍体积的、在0－4℃下预冷过的去离子水，第二次离心处理得上清液；然后将第二次离心处理得到的上清液进行超滤浓缩处理，进行第三次离心分离处理获得上清液，将该上清液迅速冷却到4℃，获得蝌蚪除盐SOD浓缩液； P、将所述的蝌蚪除盐SOD浓缩液进行真空浓缩； Q、将真空浓缩处理的蝌蚪除盐SOD浓缩液在‑20℃进行冻结；冷冻干燥，得到蝌蚪SOD初级冻干粉；R、向所述的蝌蚪SOD初级冻干粉中加入预冷到0－4℃的重蒸水，在‑4℃的操作环境中离心分离处理，收集上清液；将该上清液真空浓缩后放入‑20℃进行冻结，再进行真空冷冻干燥、粉碎处理，得到SOD复合酶蝌蚪冻干粉； Ⅱ、SOD复合酶蝌蚪冻干粉的修饰a. 采用高碘酸钠活化，得到活化的右旋糖苷；b.将所述的活化的右旋糖苷溶解于无水碳酸钠缓冲液，得到混合溶液C；向所述的混合溶液C中加入所述的SOD复合酶蝌蚪冻干粉，在4℃的条件下避光保存17小时，得到混合溶液D，再用硼酸调节pH值为7.6；再向所述的混合溶液D中加入牛血清白蛋白、戊二醛水溶液，得到混合溶液E，静置保存3小时；所述的戊二醛水溶液的浓度为25%；向所述的混合溶液E中加入甘氨酸，得到混合溶液F，在4℃的条件下放置4小时，用硼氢化钠调节其pH值为7.6；向调节pH值后的混合溶液F中加入丙酮，在4℃的条件下静置30分钟，得到沉淀物F；将所述的沉淀物F进行冷冻真空干燥处理，得到修饰过的SOD复合酶蝌蚪冻干粉；所述的右旋糖苷、无水碳酸钠缓冲液、SOD复合酶蝌蚪冻干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸的重量比为：0.4‑0.8：4800‑5200：18‑22：4‑7：23‑26：48‑52；所述鹅肝提取物由下述制备方法获得：Ⅲ.鹅肝提取物制备a. 取鹅的肝脏进行洁净处理并磨成肝浆；b. 向所述的肝浆中加入磷酸钾盐缓冲液，超声破碎处理，得到鹅肝超声破碎物；所述的肝浆与磷酸缓冲液的体积比为0.8‑1.2：1.8‑2.5；所述的磷酸缓冲液的浓度为0.1mol/L，pH值为7.6；c.将所述的鹅肝超声破碎物进行粗滤，得到鹅肝滤液；d. 向所述的鹅肝滤液中加入硅藻土，搅拌均匀后，离心分离处理，收集鹅肝初级上清液和鹅肝初级沉淀物；所述的滤液与硅藻土的重量比为100：5；e. 将所述的鹅肝初级上清液过滤，得到鹅肝精滤液；鹅肝精滤液喷雾干燥，得到鹅肝粉末A；所述的过滤采用0.45μm的滤膜；f. 将所述的鹅肝初级沉淀物中加入盐酸溶液，搅拌加热处理，得到鹅肝水解液；所述的鹅肝沉淀物与盐酸溶液的重量比为0.8‑1.2：3.5‑4.5；所述的盐酸溶液的浓度为6mmol/L；搅拌加热的温度为110℃－120℃，处理时间为24小时；g. 将所述的鹅肝水解液减压蒸馏浓缩处理到原来体积的1/4，得到鹅肝一级浓缩液；再将鹅肝一级浓缩液中加入蒸馏水，减压蒸馏浓缩处理，直到鹅肝一级浓缩液与蒸馏水总体积变为原来的1/4，得到鹅肝二级浓缩液；再将鹅肝二级浓缩液中加入蒸馏水，减压蒸馏浓缩处理，直到鹅肝二级浓缩液与蒸馏水总体积变为原来的1/4，得到鹅肝三级浓缩液；再将鹅肝三级浓缩液中加入蒸馏水，减压蒸馏浓缩处理，直到鹅肝三级浓缩液与蒸馏水总体积变为原来的1/4，得到鹅肝四级浓缩液；h. 将所述的鹅肝四级浓缩液进行脱色、过滤处理，得到鹅肝脱色过滤液；i. 将所述的鹅肝脱色过滤液减压蒸馏、喷雾干燥，得到鹅肝粉末B；j. 合并所述的鹅肝粉末A和鹅肝粉末B，混合后粉碎，得到鹅肝提取物; 所述小麦胚芽提取物由下述制备方法获得：Ⅳ.小麦胚芽提取物制备a. 将小麦胚芽进行洁净处理，向小麦胚芽中加入碱液磨浆，得到小麦胚芽浆；所述的小麦胚芽与碱液的重量比为2：1，所述的碱液的pH值为8.0；b. 向所述的小麦胚芽浆中加入碱液进行提取处理，得到小麦胚芽提取液；所述的小麦胚芽浆与碱液的体积比为0.8‑1.2∶6.5‑7.5；所述的碱液的pH值为8.0；所述提取处理时间为8h；c. 将所述的小麦胚芽提取液进行离心处理，分别收集小麦胚芽一次沉淀物和小麦胚芽一次上清液；离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟；d. 将所述的小麦胚芽一次上清液过滤、喷雾干燥，得到小麦胚芽粉末A；所述的过滤采用0.45μm滤膜； e. 将所述的小麦胚芽一次沉淀物烘干、粉碎，得到小麦胚芽粉碎物；f. 向所述的小麦胚芽粉碎物中加入乙醇水溶液, 微波萃取处理，得到小麦胚芽萃取液；所述的小麦胚芽粉碎物与乙醇水溶液的重量比为5.5‑6.5：0.8‑1.2；所述的乙醇水溶液的浓度为 50％；所述的微波萃取处理的方式是：将所述的小麦胚芽粉碎物与乙醇水溶液的混合物微波萃取20秒后，取出微波萃取设备冷却至室温，再重新放入微波萃取设备萃取，直到累计微波萃取时间至2分钟，得到小麦胚芽萃取液；g. 将所述的小麦胚芽萃取液进行离心处理，收集小麦胚芽二次上清液；在所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟； h. 将所述的小麦胚芽二次上清液过滤，得到小麦胚芽滤液；所述的过滤采用0.45μm滤膜；i. 将所述的小麦胚芽滤液进行浓缩、喷雾干燥，得到小麦胚芽粉末B；j. 将所述的小麦胚芽粉末A和小麦胚芽粉末B混合、过筛，得到小麦胚芽提取物；所述的过筛采用20目筛子；所述红花提取物由下述制备方法获得：Ⅴ. 红花提取物的制备a. 将红花冰冻、粉碎、过筛，得到红花粉末；所述的冰冻温度为‑20℃，冰冻时间为12小时；所述的粉碎、过筛均在无菌条件下进行，操作温度为0℃－4℃；所述的过筛采用40目筛子；b. 向所述的红花粉末中加入蒸馏水，蒸煮后降温，再进行离心处理，分别收集红花一次沉淀物和红花一次上清液；所述的红花粉末与蒸馏水的重量比为0.8‑1.2：12.5‑13.5；所述的蒸馏水的温度为100℃；所述的蒸煮在密封容器中进行，蒸煮的时间为15分钟；在所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟；                c. 向所述的红花一次沉淀物加入蒸馏水，蒸煮后降温，再进行离心处理，得到红花二次上清液；所述的蒸馏水的温度为100℃；所述的蒸煮在密封容器中进行，蒸煮的时间为10分钟；离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟；  d. 合并所述的红花一次上清液和红花二次上清液，过滤后得到红花滤液；所述的过滤采用0. 45 μm 微孔滤膜；e. 将所述的红花滤液浓缩为原来体积的1/4，然后喷雾干燥，得到红花提取物；所述苦荞提取物由下述制备方法获得：Ⅵ. 苦荞提取物制备a. 将苦乔麸皮粉碎，过筛，得到麸皮粉；所述的过筛采用40目筛子；b. 向所述的麸皮粉中加入乙醇溶液，进行浸泡，得到苦荞浸泡液；所述的麸皮粉与乙醇水溶液的重量比为0.8‑1.2：45‑55；所述的乙醇水溶液的浓度为85％；所述的浸泡时间为8小时；c.将所述的苦荞浸泡液进行微波萃取处理，得到苦荞萃取液；所述的微波萃取处理的方式是：将所述的苦荞浸泡液微波萃取20秒后，取出微波萃取设备冷却至室温，再重新放入微波萃取设备萃取，直到累计微波萃取时间至2分钟，得到苦荞萃取液；所述的萃取液的温度为80℃－100℃； d. 将所述的苦荞萃取液离心处理，收集苦荞上清液；所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟； e. 将所述的苦荞上清液过滤，得到苦荞滤液；所述的过滤采用0. 45 μm 微孔滤膜；f. 将所述的苦荞滤液浓缩处理，得到苦荞浸膏；将所述的苦荞浸膏干燥、粉碎、过筛，得到苦荞提取物；所述的干燥温度为70℃；所述的过滤采用20目筛子；所述辅酶Q10由下述制备方法获得：Ⅶ. 辅酶Q10制备a. 取猪的心脏洁净处理并绞成心浆液；取猪的心脏，清洗、冷冻、切成猪心切片；向所述的猪心切片中加入焦性没食子酸，绞成心浆液；所述的冷冻时间为12小时；所述的猪心切片与焦性没食子酸的重量比为100：7；b. 向所述的心浆液中加入磷酸钾盐缓冲液，超声破碎处理，得到猪心超声破碎液；所述的心浆液与磷酸钾盐缓冲液的重量比为1.5‑2.5：0.8‑1.2，所述的磷酸钾盐缓冲液的浓度为0.1mol/L，pH值为7.6，温度为4℃；所述的超声破碎处理时间为45分钟；c. 向所述的猪心超声破碎液中加入氢氧化钠‑乙醇溶液，进行皂化处理，得猪心皂化液；所述的猪心超声破碎液与氢氧化钠‑乙醇溶液的体积比为0.8‑1.2：1.5‑2.5；所述的氢氧化钠‑乙醇溶液中，氢氧化钠与无水乙醇的重量比为0.8‑1.2：8‑12；d. 向所述的猪心皂化液中加乙醚、水，过滤处理，得到猪心一级滤液和猪心一级沉淀物；向所述的猪心一级沉淀物加入乙醚，过滤处理，得到猪心二级滤液和猪心二级沉淀物；向所述的猪心二级沉淀物加入乙醚，过滤处理，得到猪心三级滤液和猪心三级沉淀物；所述的猪心皂化液、乙醚、水的体积比为8‑12：0.8‑1.2：0.8‑1.2；所述的猪心一级沉淀物与乙醚的重量比为0.8‑1.2：0.5‑1.5；所述的猪心二级沉淀物与乙醚的重量比为0.8‑1.2：0.5‑1.5；所述的过滤采用纱布；e. 合并所述的猪心一级滤液、猪心二级滤液，和猪心三级滤液，得到猪心总滤液；向所述的猪心总滤液中加入蒸馏水，萃取处理，得到猪心水洗萃取液；f. 将所述的猪心水洗萃取液过滤，再浓缩处理，得到猪心浓缩液；所述的猪心水洗萃取液与猪心浓缩液的体积比为0.8‑1.2：8‑12；所述的过滤采用0. 45 μm 微孔滤膜；所述的浓缩处理在减压浓缩罐中进行，浓缩处理的温度为40℃－50℃；g. 将所述的猪心浓缩液引入硅胶柱中，先用石油醚洗去杂质，再用乙醚－石油醚混合液洗脱，得到猪心辅酶Q10洗脱液；所述的乙醚－石油醚混合液中，乙醚和石油醚的体积比为1：1；i. 将所述的猪心辅酶Q10洗脱液进行浓缩、溶解、过滤、结晶，得到辅酶Q10； 所述白藜芦醇由下述制备方法获得：Ⅷ. 白藜芦醇制备a. 将葡萄皮粉碎、过筛，得到葡萄皮粉末；所述的过筛采用40目筛子；b. 向所述的葡萄皮粉末加入甲醇，萃取处理，得到葡萄皮一次萃取液；所述的葡萄皮粉末与甲醇的重量比为0.8‑1.2：35‑45；所述的萃取处理采用进行微波萃取；c.将所述的葡萄皮一次萃取液离心处理，收集葡萄皮一次上清液和葡萄皮一次沉淀物；在所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟； d. 向所述的葡萄皮一次沉淀物中加入甲醇，萃取处理，得到葡萄皮二次萃取液；所述的葡萄皮一次沉淀物与甲醇的重量比为0.8‑1.2：35‑45；所述的萃取处理采用进行微波萃取；e. 将所述的葡萄皮二次萃取液离心处理，得到葡萄皮二次上清液；在所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，时间为25分钟；f. 合并所述的葡萄皮一次上清液和葡萄皮二次上清液，过滤后得到葡萄皮滤液；所述的过滤采用0. 45 μm 微孔滤膜；g. 将所述的葡萄皮滤液，浓缩处理，得到葡萄皮浓缩固体；将所述的葡萄皮浓缩固体用石油醚洗涤，得到洗涤后的葡萄皮浓缩固体；所述的葡萄皮浓缩固体与石油醚的重量比为1：2；h. 用乙酸乙酯将所述的葡萄皮浓缩固体溶解后引入硅胶柱，再用甲醇－水混合液洗脱，得到白藜芦醇洗脱液；所述的甲醇－水混合液中，甲醇与水的体积比为4：1；i. 将所述的白藜芦醇洗脱液浓缩、喷雾干燥，得到白藜芦醇。