发明名称 |
TaqMan-COLD-PCR方法检测外周血中JAK2V617F突变率 |
摘要 |
TaqMan-COLD-PCR方法检测外周血中JAK2V617F突变率以外周血基因组DNA作为检测标本,在一个反应体系内完成检测,对JAK2V617F突变百分率进行定量检测,检测下限为0.1%,具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、报告时间短等特点,尤其适用于少量突变克隆株的检测。本发明解决的技术问题是,克服背景技术的不足,提供一种高敏感性的外周血基因组DNA中检测JAK2V617F的突变率的方法。由于JAK2V617F突变作为骨髓增殖性疾病唯一分子诊断标志物,已纳入骨髓增殖性疾病诊断标准中,该发明将明显提高上述疾病的诊断率。同时也可用于上述疾病治疗过程中疗效监测。 |
申请公布号 |
CN102321741A |
申请公布日期 |
2012.01.18 |
申请号 |
CN201110221646.9 |
申请日期 |
2011.08.04 |
申请人 |
航天中心医院 |
发明人 |
梁国威 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
本发明是一种高敏感性的在外周血基因组DNA中检测JAK2V617F突变率的方法,以TaqMan/MGB探针技术结合荧光定量cold‑PCR技术的双探针单反应体系的新检测方法,包括:JAK2V617F野生型、突变型质粒标准品的构建、校准,PCR测定体系中引物和探针的设计,PCR扩增变性温度的选择,突变率标准曲线的建立,其特征在于:可对JAK2V617F突变百分率进行定量检测,突变率检测下限0.1%,标本易留取,具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、检测报告时间短等特点。 |
地址 |
100049 北京市海淀区玉泉路15号147信箱 |