β-葡聚糖内切酶PEGase-2基因及其表达产物和应用

摘要

本发明公开一种从多头绒泡菌分离的β-葡聚糖内切酶PEGase-2基因，该基因编码的蛋白由305氨基酸组成，其氨基酸序列与嗜热拟青霉有44％的同源性，模拟的三级结构呈β-三明治折叠卷状，属于糖苷水解酶的GH16家族成员。将该基因重组到表达载体上后分别转化到酵母和里氏木霉内，表达的蛋白能分泌到细胞外，该蛋白可通过40％～70％的硫铵分级沉淀粗分离，可通过HiTrapTMCaptoTM Q离子交换层析胶纯化，并且能特异性的水解大麦β-1，3(4)-葡聚糖，其水解海带多糖的活力较高，其水解大麦β-1，3(4)-葡聚糖的活力可在金属离子存在下得到提高，可以应用于啤酒酿造，以及作为药品、食品和饲料添加剂。

主权项

一种β‑葡聚糖内切酶PEGase‑2基因，其特征在于，包括如下序列：(a)、编码由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；(b)、和编码由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽的多核苷酸具有至少98％同源性的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；(c)、编码多肽的多核苷酸或所述多核苷酸的互补链，所述多肽由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成，其中一个或多个氨基酸被缺失、替代或增加，且所述多肽具有β‑葡聚糖内切酶活性；或(d)、编码多肽的多核苷酸或所述多核苷酸的互补链，所述多肽与由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少98％的同源性。