携带人β珠蛋白基因的β^IVS-Ⅱ-654转基因小鼠模型的制备方法

摘要

本发明公开了一种携带人β珠蛋白基因的βIVS-II-654地中海贫血转基因小鼠模型的制备方法。这种小鼠模型的基因组中稳定整合了慢病毒载体介导的人β珠蛋白基因，并且能持续稳定的表达，而且可以遗传给后代并能维持原表达水平，携带人β珠蛋白基因的βIVS-II-654地中海贫血模型小鼠的血液学以及病理学等表型得到改善。本发明制备的模型鼠可用于评价慢病毒载体介导人β珠蛋白基因治疗βIVS-II-654地中海贫血的有效性、稳定性和安全性。

主权项

一种携带人β珠蛋白基因的βIVS‑II‑654转基因小鼠模型的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A、人β珠蛋白基因片段的克隆；B、人β珠蛋白基因启动子的克隆；C、将人β珠蛋白基因、人β珠蛋白基因启动子克隆到载体质粒，构建携带人β珠蛋白基因的慢病毒载体LBG，所述慢病毒载体LBG是SEQ ID No.3所示的序列；D、将慢病毒载体LBG与包装质粒共转染细胞，培养后获得病毒颗粒；E、将病毒颗粒进行βIVS‑II‑654小鼠受精卵的卵周间隙显微注射，得到携带人β珠蛋白基因的βIVS‑II‑654转基因小鼠。