黄瓜亚硝酸盐主效QTL紧密连锁的分子标记方法

摘要

本发明是一种黄瓜亚硝酸盐主效QTL紧密连锁的分子标记方法，属于黄瓜育种和分子生物学领域。将亚硝酸盐含量低的黄瓜品种D0327(2.56mg·kg-1)作父本与亚硝酸盐含量高的黄瓜品种1058(8.92mg·kg-1)作母本进行杂交，对F2的每个单株的基因型与每个单株的果实亚硝酸盐数据进行遗传连锁分析，获得与D0327亚硝酸盐主效QTL紧密连锁的分子标记CSWTA17。通过检测D0327及其衍生品种(品系)的DNA是否含有分子标记CSWTA17，可预测亚硝酸盐水平，从而加快低亚硝酸盐黄瓜新品种的选育速度。

主权项

与黄瓜亚硝酸盐主效QTL紧密连锁的分子标记，是通过以下方法获得的：a亚硝酸盐含量低的黄瓜品种D0327(2.56mg·kg 1)与亚硝酸盐含量高的黄瓜品种1058(8.92mg·kg 1)作母本进行杂交，得到杂种F1；b由杂种F1代自花授粉获得F2代；c分离每个单株黄瓜叶片的DNA，采用简单重复序列标记(SSR)引物进行PCR扩增，6％丙烯酰胺凝胶上电泳分离，获得分子标记数据；d基于遗传连锁交换定律，对分子标记分析资料构建黄瓜遗传连锁图；e在果实收获以后，测定F2代每个单株果实的亚硝酸盐，2.6mg·kg 1以上为高亚硝酸盐型，2.6mg·kg 1以下为低亚硝酸盐型，f将F2代每个单株果实的亚硝酸盐与黄瓜遗传连锁图谱进行连锁和QTL分析，将LOD≥3.0作为QTL存在的阙值，确定与黄瓜亚硝酸盐主效QTL连锁的分子标记CSWTA17。