聚乙烯醇涂层毛细管的制备方法及应用

摘要

本发明涉及聚乙烯醇涂层毛细管制备方法及其应用，制备方法是采用氨丙基三乙氧基硅烷为硅烷化试剂冲洗预处理后的毛细管柱1-3h。氨丙基三乙氧基硅烷为含有20-50％氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液。选用戊二醛溶液为醛基修饰试剂，冲洗硅烷化后的毛细管柱1-2h。戊二醛溶液为含5-30％戊二醛的pH 9.0的60mM磷酸缓冲液。将5-10％PVA的水溶液同5M HCl水溶液按9∶1混合。用混合液冲洗醛基修饰后的毛细管柱1-5h；随后，管柱分别用水、甲醇冲洗，最后氮气吹干。本发明的聚乙烯醇涂层毛细管应用于蛋白质细管电泳分析中。可以保证较高的分离效率及分离度。

主权项

一种聚乙烯醇涂层毛细管的制备方法，其特征是步骤如下：1)毛细管预处理；未经任何修饰的毛细管首先用1M NaOH溶液冲洗，除去管内碱溶性杂质以及将管壁硅氧键打开形成硅羟基，随后用1M HCl溶液冲洗管柱除去管内酸溶性杂质；2)毛细管内壁硅烷化反应：将预处理后的毛细管柱用20‑50％的氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液冲洗管柱；冲洗1‑3h后，毛细管柱再用丙酮溶液冲洗，随后用氮气吹干；3)管壁醛基修饰反应：用5‑30％的戊二醛的pH9.0，50mM磷酸缓冲液冲洗上步反应完成后制得的管柱1‑2h，进而将醛基固定到毛细管内壁，制得醛基修饰的毛细管柱；4)聚乙烯醇键合反应：先将5‑10％聚乙烯醇的水溶液同5M HCl水溶液按9∶1混合；用混合液冲洗醛基修饰后的毛细管柱1‑5h；进而将聚乙烯醇化学键合毛细管内壁上。