一种用于mtDNA等位基因分型及点突变检测的ARMS-PCR方法

摘要

一种用于mtDNA等位基因分型及点突变检测的ARMS-PCR方法，特异性ARMS引物设计时，上游引物或下游引物在3’末端倒数3-4位增加设置两个连续的碱基错配，错配方式为A-T或G-C的互换；ARMS-PCR扩增时增加模板mtDNA为常规用量的2～10倍。本发明通过改进ARMS-PCR，使其适用于mtDNA突变或mtSNPs等位基因分型检测。与现有mtDNA多态性或基因变异检测技术相比，本发明的方法不仅结果高度可靠，而且操作为简便易行，并极大地加速了分析过程、降低了费用并减少了工作量。

主权项

一种用于mtDNA等位基因分型及点突变检测的ARMS‑PCR方法，依次包括ARMS引物设计、ARMS‑PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳、根据阳性反应确定基因型的步骤，其特征在于：所述特异性ARMS适配引物设计步骤中，引物3’末端终止在待诊位点，在上游或下游ARMS引物3’倒数3‑4位增加设置两个连续的碱基错配，错配方式为A‑T或G‑C的互换；所述ARMS‑PCR扩增时增加模板mtDNA为常规用量的2~10倍。