D-半胱氨酸酶法转化制备方法

摘要

本发明属于医药生物技术领域的D-半胱氨酸酶法转化制备方法。该制备方法采用DL-半胱氨酸作为原料，将具有高活力L-色氨酸酶的基因工程菌与含有DL-半胱氨酸的混合氨基酸或DL-半胱氨酸盐酸盐的转化液混合，30～45℃下进行酶促反应，然后用等电点结晶法或等电点结晶与离子交换树脂相结合的方法分离转化产物，得到高纯度D-半胱氨酸和L-色氨酸。该方法实现了D-半胱氨酸和L-色氨酸的同时生产，具有原料价格低廉，操作简便，转化时间短，生产成本低优点。

主权项

一种D‑半胱氨酸酶法转化制备方法，其特征是由以下步骤构成：(1)具有高活力L‑色氨酸酶的基因工程菌WW‑4，在含有IPTG或乳糖的培养基中培养，产生高活力的L‑色氨酸酶；(2)用游离细胞法，将含酶细胞或酶提取液与缓冲液配制的含有DL‑半胱氨酸的混合氨基酸或DL‑半胱氨酸盐酸盐的转化液混合，再加入适量的吲哚、表面活性剂和磷酸吡哆醛，在30～45℃条件下进行酶促反应，将反应生成物进行分离，得到高纯度的D‑半胱氨酸，同时还得到L‑色氨酸。