一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法，其目的是解决目前酿酒酵母表达载体多以营养缺陷为筛选标记，难以在工业酵母菌株进行基因工程改造过程中使用这一难题。其构建方法步骤如下：克隆KanMX基因，与pYES2.0载体连接，构建质粒pYES-Kan1。同时，以酿酒酵母染色体DNA为模板，克隆pPGK启动子基因，将其与pYES-Kan1质粒连接，将其原来的pGAL诱导型启动子替换为pPGK启动子，从而构建组成型酿酒酵母表达质粒pPGK-KanMX。本发明操作简单，构建的质粒无需对工业酵母菌株进行营养缺陷改造即可进行基因操作，大大简化了酵母基因工程改造过程。

主权项

一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法，其特征在于，以pYES 2.0为基本骨架，酿酒酵母表达载体含有组成型启动子pPGK基因。