一种乳杆菌产抗植物致病真菌发酵液的制备方法

摘要

本发明涉及一种乳杆菌产抗植物致病真菌发酵液的制备方法，步骤是(1)种子发酵液的制备：用MRS液体培养基将乳杆菌菌株活化1-2次后，接种于三角瓶中，35～40℃恒温静置厌氧培养24～48h，成为种子发酵液；(2)发酵物的制备：在装有发酵培养基和中和剂发酵罐中按照10％的体积比接入上述种子发酵液进行发酵，培养方式为分批补料发酵培养，35～39℃静置厌氧培养40～60h，控制pH值在6.4～6.7，发酵结束后，即可获得发酵物；(3)发酵液成品的制备：将发酵物过滤，去除细胞，即得到该乳杆菌的发酵液。本发明能够稳定地获得乳杆菌发酵物，该乳杆菌发酵液具有较高的生物量和抗植物致病真菌活性，可用于制备防治植物真菌病害杀菌剂，为天然生物农药的开发提供了新的资源。

主权项

一种乳杆菌产抗植物致病真菌发酵液的制备方法，其特征在于：制备方法的步骤是：(1)种子发酵液的制备：用MRS液体培养基将乳杆菌菌株活化1‑2次后，接种于三角瓶中，35～40℃恒温静置厌氧培养24～48h，成为种子发酵液；(2)发酵物的制备：在装有发酵培养基和中和剂发酵罐中按照10％的体积比接入上述种子发酵液进行发酵，培养方式为分批补料发酵培养，35～39℃静置厌氧培养40～60h，控制pH值在6.4～6.7，发酵结束后，即可获得发酵物；(3)发酵液成品的制备：将发酵物过滤，去除细胞，即得到该乳杆菌的发酵液；所述的MRS培养基的构成为：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，吐温‑80 1ml，柠檬酸三铵2g，K2HPO4 2g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，MgSO4·7H2O 0.1g，MnSO4 0.05g，水1.0L，其pH为6.4～6.7；所述的发酵培养基的构成为：豆饼粉水解液100ml，玉米浆粉10.0g，葡萄糖6.0g，MgSO4·7H2O 1.0g，K2HPO4，MnSO4 50ppm，水1.0L，pH6.4～6.7；所述的中和剂为Ca(OH)2，是控制发酵液pH值的中和剂。