一种高纯度猪血白蛋白的生产工艺及其应用

摘要

本发明公开了一种高纯度猪血清白蛋白的生产提取工艺，它由以下步骤组成：在猪血中加入枸橼酸钠、氯化钠，分离血浆与红细胞，血浆经离心，膜过滤提取后，放入夹层反应罐内，加热加入醇、辛酸钠、氯化钠，缓慢搅拌，分两次加入盐酸调pH值，离心，上清液加沉淀试剂磨成糊状，搅拌，冷藏过夜后离心分离沉淀，沉淀加水溶解，以氢氧化钠溶液调pH后静置，离心分离上清液，膜过滤和病毒灭活，冻干为成品。本工艺用料少，工艺流程短，生产效率高，操作容易，生产成本低，产品质量好，适合大批量生产。本产品可用作纤维蛋白胶封闭剂制备的辅料，生化原料，也可用作其它白蛋白的替代品。

主权项

一种高纯度猪血清白蛋白的生产工艺，其特征在于包括以下步骤：A、取新鲜猪血加入血量的0.38％的枸橼酸钠、0.09％氯化钠，将血液于0‑10℃冷库中静置，待血浆与红细胞分层后，用虹吸法吸取血浆，下层血球另用；B、取上述分离血浆，置于具有制冷装置的离心系统中，设定冷冻系统的温度为2℃‑8℃，开启离心机离心，收集血浆，血浆再用0.22μm的滤器过滤，得精制血浆；C、将精制血浆放入夹层反应罐内，夹层罐加热至65℃～80℃；取猪血浆容积的0.28‑0.38％的辛酸钠、0.9％氯化钠，加入到与血浆等体积量的纯化水中溶解，溶解后溶液加入到血浆中，再加入乙醇或甲醇溶液，使醇的体积浓度达到5.0％‑10.0％，搅拌均匀，加入盐酸调pH值为5.5～6.5，并在温度为65℃～80℃下保温20min‑60min后，将溶液加入到搅拌罐中，使溶液降温到室温，再次用盐酸调pH值为3.8～4.5，密封放置；D、取上述溶液，置离心系统中离心，收集上清液，加入选自聚乙二醇6000、聚乙二醇4000或聚乙二醇5000的沉淀试剂，使其浓度为20％‑25％，用胶体磨边加上清液边加沉淀试剂打磨成糊状，搅拌后于2～8℃冷库保存过夜；E、取上述混合溶液，置高速冷冻离心系统中，设定冷冻系统的温度为2℃‑10℃，离心分取沉淀，‑20℃冷库中保存备用；F、根据血浆量称取注射用水，加入到上述沉淀中，搅拌至完全溶解，用氢氧化钠溶液调节pH值为6.0‑7.5，室温放置；置高速冷冻离心系统中，设定冷冻系统的温度为8℃‑10℃，离心收集上清液；上清液用洁净的0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液备用；G、病毒灭活：设定水浴的温度为60℃，将过滤后的溶液放至水浴中，待溶液的温度达到60℃，保温放置10小时，进行病毒灭活，然后用0.22μm的滤膜过滤，取样检测蛋白质含量；H、冻干，将病毒灭活滤液按冻干曲线冻干，得到成品，冻干曲线为：将病毒灭活滤液迅速冷却至‑45℃，持续1‑2小时，升到‑20℃，持续10‑20小时，再缓慢升温到0℃，再持续4‑8小时升到室温25℃。