发明名称 金叶丝兰的组织培养方法
摘要 本发明涉及金叶丝兰的组织培养方法,包括无菌材料的获得,芽的分化和增殖,不定芽壮苗培养,生根培养,炼苗与移栽等步骤。与现有技术相比,本发明大大提高了金叶丝兰的繁殖速度和苗的整齐度,并提高了其性状的稳定性,可实现育苗的工厂化大批量生产。
申请公布号 CN101869063B 申请公布日期 2012.01.04
申请号 CN200910049971.4 申请日期 2009.04.24
申请人 上海上房园林植物研究所 发明人 陈建华;黄建荣;沈勤
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人 林君如
主权项 金叶丝兰的组织培养方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)无菌材料的获得取萌发的幼嫩的芽,去除外面包裹的叶片后,用自来水冲洗1‑3h后于超净工作台上,依次利用质量浓度为70‑75%的乙醇浸泡10‑50s,体积浓度为0.5‑2‰的汞浸泡10‑30min,再用无菌水冲洗4‑6次,利用无菌滤纸吸干芽表面的水分后,将芽切成0.5‑2cm长的带芽的节段,节段接种于芽诱导培养基上;(2)芽的分化和增殖节段接种于芽诱导培养基上2‑4周后,芽部位开始膨大,出现黄绿色突起,3‑5周后见芽分生组织,再培养1‑2个月,芽长到1‑3cm,将不定芽切下转入不定芽增殖培养基中进行增殖培养,芽的基部虽有较多愈伤组织,但不影响不定芽的增殖,不定芽生长迅速且无玻璃化的不良现象,在培养基中生长发育良好;(3)不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上,诱导出的丛生芽中每丛有2‑3株能够伸长,其余的处于矮化状态,将丛生芽分成小丛后,转至壮苗培养基上生长,不定芽迅速伸长,20‑40天后长至1.5‑3cm;(4)生根培养取1.5‑3cm的不定芽小植株,转接入生根培养基中诱导生根,5‑15天后幼苗基部分化出白色的根原基,25‑35天后长至2‑3cm,根系粗壮,须根众多,生根率为90‑100%;(5)炼苗与移栽生根培养20‑30天,根系长至1‑2cm时,选择根系发达、生长健壮的无菌苗,于室内开瓶炼苗1‑3天,然后将苗取出,洗净根部的琼脂,栽于温室内的苗床中驯化20‑40天,即移栽室外,给予肥水管理,最终的移栽成活率为90‑100%;所述的芽诱导培养基包括MS+6‑BA1.0‑3.0mg/L+NAA0.1‑0.3mg/L;所述的不定芽增殖培养基包括MS+6‑BA0.5‑2.0mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L;所述的壮苗培养基包括MS+6‑BA0.5‑2.0mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L;所述的生根培养基包括MS+NAA0.05‑0.2mg/L。
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