新颖胺甲醯化ＥＰＯ和其生产方法

主权项

一种用于生产一种藉由ESI质谱分析法测量时具有少于大约40%集结的蛋白质与少于占重量大约40%之过度和低度胺甲醯化蛋白质之胺甲醯化促红血球生成素蛋白质的方法，该方法包括使一量之促红血球生成素与一量之氰酸盐在足以使该促红血球生成素上之离胺酸和N-端的胺基酸的胺基有至少大约90%被胺甲醯化之温度、pH与时间下接触，其中该与氰酸盐接触之促红血球生成素蛋白质的浓度是从大约2毫克/毫升到大约5毫克/毫升，该氰酸盐的浓度是从大约0.05M到大约2M，该温度的范围是从大约30℃到大约34℃，该pH的范围是从大约8到大约10，且该时间是从大约1小时至5天。根据申请专利范围第1项的方法，其中该胺甲醯化促红血球生成素是人类促红血球生成素。根据申请专利范围第1项的方法，其中该促红血球生成素是与该氰酸盐在缓冲液存在下接触的。根据申请专利范围第3项的方法，其中该缓冲液是硼酸盐。根据申请专利范围第3项的方法，其中该缓冲液的浓度是从大约0.05M到大约2M。根据申请专利范围第3项的方法，其中该缓冲液的浓度大约是0.5M。根据申请专利范围第1项的方法，其中该与氰酸盐接触之促红血球生成素蛋白质的浓度大约为3毫克/毫升，该氰酸盐的浓度大约为0.5M，该温度大约为32℃，该pH大约为9.0，且该时间大约为24小时。一种用于生产一种藉由ESI质谱分析法测量时具有少于大约3%集结的蛋白质与少于占重量大约40%之过度和低度胺甲醯化蛋白质之胺甲醯化促红血球生成素蛋白质的方法，该方法包括：(a)使一量之促红血球生成素与一量之氰酸盐在足以使该促红血球生成素上之离胺酸和N-端的胺基酸的胺基有至少大约90%被胺甲醯化之温度、pH与时间下接触；以及(b)利用阴离子交换、阳离子交换、厌水性交互作用色层分析术、逆相色层分析术、亲和性色层分析术或分子大小排除法色层分析术来纯化该胺甲醯化促红血球生成素，其中该与氰酸盐接触之促红血球生成素蛋白质的浓度是从大约2毫克/毫升到大约5毫克/毫升，该氰酸盐的浓度是从大约0.05M到大约2M，该温度的范围是从大约30℃到大约34℃，该pH的范围是从大约8到大约10，且该时间是从大约1小时至5天。根据申请专利范围第8项的方法，其中该胺甲醯化促红血球生成素是人类促红血球生成素。根据申请专利范围第8项的方法，其中该促红血球生成素是与该氰酸盐在缓冲液存在下接触的。根据申请专利范围第10项的方法，其中该缓冲液是硼酸盐。根据申请专利范围第10项的方法，其中该缓冲液的浓度是从大约0.05M到大约2M。根据申请专利范围第10项的方法，其中该缓冲液的浓度大约是0.5M。根据申请专利范围第8项的方法，其中该与氰酸盐接触之促红血球生成素蛋白质的浓度大约为3毫克/毫升，该氰酸盐的浓度大约为0.5M，该温度大约为32℃，该pH大约为9.0，且该时间大约为24小时。