应用免疫胶体金技术从不同消化裂解液中纯化DNA的方法

摘要

本发明公开了一种应用免疫胶体金技术从不同消化裂解液中纯化DNA的方法。该方法是将消化裂解液离心，收集上清液，在上清液（体积1ml以内）中加入5-15μl免疫胶体金（胶体金颗粒直径15-30nm）室温振荡孵育10-45分钟，孵育形成DNA-免疫胶体金颗粒复合物后离心洗脱保留沉淀。沉淀为吸附了DNA的免疫胶体金，加入3%FCS（小牛血清）500-1000μl，混匀悬浮沉淀，用离心方法使免疫胶体金颗粒沉淀，吸弃上清，保留沉淀；加入纯水500-1000μl，混匀悬浮沉淀，用离心方法使免疫胶体金颗粒沉淀，吸弃上清，保留沉淀，得到DNA-免疫胶体金颗粒复合物沉淀。可直接用于PCR反应。本发明可以使DNA提取液从1ml以上大体系浓缩成1-2微升，被浓缩的DNA纯度和产率极高，足以达到超微量分析的标准，便于操作、无环境污染，适用范围广。

主权项

一种应用免疫胶体金技术从不同消化裂解液中纯化DNA的方法，其特征是：a、首先将不同消化裂解液液体加热后离心，收集上清液，弃沉淀；b、然后将该上清液加入免疫胶体金，室温振荡孵育10‑45分钟，当上清液体积在1ml以下，则加入5‑15μl免疫胶体金，胶体金颗粒直径15‑30nm；c、用离心方法使免疫胶体金颗粒沉淀，吸弃上清，保留沉淀；d、加入3%FCS（小牛血清）500‑1000μl，混匀悬浮沉淀，用离心方法使免疫胶体金颗粒沉淀，吸弃上清，保留沉淀；e、加入纯水500‑1000μl，混匀悬浮沉淀，用离心方法使免疫胶体金颗粒沉淀，吸弃上清，保留沉淀，此步骤至少１次，得到DNA‑免疫胶体金颗粒复合物沉淀。