主权项 |
一种利用浓缩椰子水提高文心兰原球茎增殖及分化的方法,其特征在于,具体步骤如下:1)、浓缩椰子水的制备将椰子水置于旋转蒸发仪上浓缩10~15倍至椰子水的糖浓度为40~60%得到浓缩椰子水,备用;旋转蒸发仪温度控制在50~80℃,真空度‑0.07MPa,转速为30~40转/min;2)、外植体材料的选择及原球茎的诱导取文心兰植株茎尖洗净后,留长约2~3cm的幼芽,经无菌水冲洗、酒精浸泡后,加入0.15%HgCl2溶液进行灭菌,然后用无菌水冲洗,滤纸吸干,剥取茎尖接种到诱导培养基上进行诱导培养,培养温度24~28℃,PH5.8,光照度1500~2000lx,光照12小时/天;所述诱导培养基是以MS培养基为基础培养基,并添加6‑BA 4mg/L、NAA0.5mg/L、30g/L蔗糖、5.0g/L琼脂粉、1g/L活性炭和1%体积的浓缩椰子水;3)、原球茎增殖培养将诱导产生的原球茎转接到增殖培养基上进行增殖培养,培养温度24~28℃,光照度1500~2000lx下进行培养,光照12小时/天;所述增殖培养基是以MS培养基为基础培养基,并添加6‑BA 2mg/L、NAA 0.5mg/L、30g/L蔗糖、5.0g/L琼脂粉、1.0g/L活性炭和0.5~4%体积的浓缩椰子水;4)、分化培养从继代的原球茎中选取生长良好、翠绿色、结构较为致密的原球茎转入分化培养基上进行分化培养;所述分化培养基是以1/2MS培养基为基础培养基,并添加6‑BA 0.5mg/L、30g/L蔗糖、5.0g/L琼脂粉、1.0g/L活性炭和1%体积的浓缩椰子水;5)、生根壮苗将分化出的丛生芽切割成单个芽,接种在生根壮苗培养基上培养至成苗;所述生根壮苗培养基是以1/2MS培养基为基础培养基,并添加IBA 0.5mg/L、30g/L蔗糖、5.0g/L琼脂粉和1.0g/L活性炭。 |