一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法

摘要

本发明涉及一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，属于植物基因工程技术领域。选取甜高粱剑叶期2~3cm的幼穗，切成小段，接种于诱导培养基上培养，形成愈伤组织，继代培养，分化培养，进行根的诱导，移栽到温室或大田。本发明表明幼穗是建立甜高粱再生体系比较理想的一种外植体，可以用于进一步的转化研究。

主权项

一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于包括如下步骤：1）选取甜高粱剑叶期2~3 cm的幼穗,切成小段；2）接种于诱导培养基上培养，形成愈伤组织，诱导培养基为：MS基本培养基+2,4‑D 3 mg/L+KT（激动素）0.5 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；3）将诱导出的愈伤组织转移到继代培养基中培养，继代培养基为：MS基本培养基+2,4‑D 1.5 mg/L+KT（激动素）0.25 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；4）继代培养30天后，将愈伤组织转接到分化培养基中培养至出苗，分化培养基为：MS基本培养基+IAA (吲哚乙酸) 1 mg/L+ KT（激动素）0.5 mg/L+ 抗坏血酸10 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；5）将再生苗转移至生根培养基中进行根的诱导，生根培养基为：1/2MS培养基+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；6）移栽到温室或大田。