一种牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌的同时鉴定方法及其试剂盒

摘要

本发明涉及生物检测领域，具体涉及一种牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌的同时鉴定方法及其试剂盒。本发明利用人结核分枝杆菌和牛分枝杆菌之间的基因组差异，设计1条上游引物和2条不同的下游引物(下游引物分别针对牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌)，根据扩增的靶片段分别设计Taqman探针，并对两条探针进行不同的荧光标记，实现了在同一反应管中同时检测牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌，并通过不同的荧光通道加以鉴别，扩增的同时可以直接在软件上判读结果，而不用跑电泳，避免了气溶胶污染，在临床上有更大的应用前景。

主权项

一种同时鉴定牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌的方法，其特征在于采用如下引物及Taqman探针进行实时荧光定量PCR检测：5’‑AGCGCAACACTCTTGGAG‑3’为鉴别牛分枝杆菌和人结核分枝杆菌的共用上游引物；人结核分枝杆菌下游引物为5’‑GCTCGACATGCTGAATGC‑3’；人结核分枝杆菌Taqman探针序列为5’‑CGAGTCGCCGTGGCTTCTCTT‑3’；牛分枝杆菌下游引物为5’‑CCCGTAGCGTTACTGAGAAA‑3’；牛分枝杆菌Taqman探针序列为5’‑TTGACCAGCTAAGATATCCGGTACGCC‑3’。