粟酒裂殖酵母的转化方法、转化体以及异源蛋白质的制造方法

摘要

本发明提供用于获得传代中的维持稳定性更佳且能够稳定地制备目标异源蛋白质的转化体的粟酒裂殖酵母的转化方法。并且，提供基于该方法获得的转化体以及利用该转化体的异源蛋白质的制造方法。利用具有表达盒和重组位点的载体通过同源重组将所述表达盒整合到粟酒裂殖酵母的染色体的转座子基因Tf2位点的转化方法，所述表达盒包含在所述粟酒裂殖酵母内起作用的启动子、异源蛋白质结构基因以及终止子，所述重组位点与所述粟酒裂殖酵母的染色体进行同源重组。还提供基于该方法获得的转化体以及利用该转化体的异源蛋白质的制造方法。

主权项

粟酒裂殖酵母的转化方法，它是利用具有表达盒和重组位点的载体通过同源重组将所述表达盒整合到粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的染色体中的转化方法，所述表达盒包含在所述粟酒裂殖酵母内起作用的启动子、异源蛋白质结构基因以及终止子，所述重组位点与所述粟酒裂殖酵母的染色体进行同源重组，其特征在于，所述重组位点的碱基序列为将实质上具有同一碱基序列的位点作为靶位点且能够与该靶位点进行同源重组的序列，该位点分别存在于所述粟酒裂殖酵母的多个染色体中的各个不同的染色体和/或以其间夹有一个以上的必需基因的方式存在于同一染色体的多个位置。