发明名称 表皮干细胞诱导驯化为脂肪细胞的方法
摘要 本发明公开了一种表皮干细胞诱导驯化为脂肪细胞的方法,该方法是通过将eplife培养基与诱导培养基进行不同比例的混合,使表皮干细胞有充足的时间适应eplife培养基不断减少诱导培养基逐渐增加,并有利于减少向表皮分化,增加向目的细胞转变的机率。本发明方法既简单又非常有效的将表皮干细胞定向诱导驯化为脂肪细胞。并克服了本领域技术人员的偏见,首次颠覆表皮干细胞是单能干细胞的论断,证明其具有多向分化潜能。
申请公布号 CN101875915B 申请公布日期 2011.12.21
申请号 CN200910210400.4 申请日期 2009.10.30
申请人 中国人民解放军总医院 发明人 陈美霞;付小兵;韩为东
分类号 C12N5/08(2006.01)I 主分类号 C12N5/08(2006.01)I
代理机构 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 代理人 程凤儒
主权项 一种表皮干细胞诱导驯化为脂肪细胞的方法,其特征在于,该方法的具体步骤是:(1)将表皮干细胞经培养后,取稳定生长的密度为80%~95%的表皮干细胞,PBS洗细胞两遍,更换新鲜Epilife培养基,20~30h后更换为脂肪诱导培养基和干性维持培养基的混合培养基中培养3~5天,脂肪诱导培养基和干性维持培养基的浓度比为1∶3~1∶5;(2)将脂肪诱导培养基和干性维持培养基的浓度比更换为2∶3~2∶5继续培养2~3天;(3)将脂肪诱导培养基和干性维持培养基的浓度比更换为3∶2继续培养2~3天;(4)完全更换为脂肪诱导培养基无干性维持培养基,并以脂肪诱导培养基诱导其分化至少10天以上;所述的脂肪诱导培养基成分及用量为:90%基础培养基IMDM;1uM地塞米松;0.2mM吲哚美辛;0.5mM胰岛素;0.5mM异丁基‑甲基黄嘌呤;10%胎牛血清FBS;所述干性维持培养基的成分及用量为:94~98%Epilife、1%PS双抗和1~5%HKGS添加剂。
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