抗中期因子反义寡核苷酸纳米制剂及其制备与应用

摘要

本发明公开了一种具有治疗原发性肝细胞肝癌潜能的抗中期因子反义寡核苷酸纳米制剂药物及其制备方法，该制剂由阳离子纳米脂质体和抗中期因子反义寡核苷酸制成。纳米脂质体制备的工艺包括制备空白脂质体、匀化脂质体、分装、保存等步骤，该纳米脂质体的制备工艺简单、稳定性好。本发明纳米制剂相对于抗中期因子反义寡核苷酸本身而言，具有放大的抗肿瘤作用，对HepG2肝癌细胞有更加明显的抑制作用；并且体内药效学分析结果显示该纳米制剂对原发性肝癌有明显抑制作用，且兼具毒副作用小，不易产生耐药性、可实现靶向运输、在体内能够降解、生物兼容性好等优点，是一种具有良好应用前景的抗癌药物。

主权项

一种抗中期因子反义寡核苷酸纳米制剂，由1.86 mM的阳离子纳米脂质体溶液和150 μM的抗中期因子反义寡核苷酸溶液按照体积比为1.8：1混合后静置10min以上制成，其中抗中期因子反义寡核苷酸的序列为CCCCGGGCCGCCCTTCTTCA，该抗中期因子反义寡核苷酸纳米制剂的制备方法包括以下步骤：阳离子纳米脂质体制备：将阳离子脂质和中性磷脂溶于有机溶剂中，采用薄膜分散法或逆向蒸发法制备脂质体，加入糖的水溶液，水浴超声波处理得到含糖3%~30%的粗脂质体悬液，控制粒径为100~200nm，过滤除菌，得到阳离子纳米脂质体；所述的有机溶剂选自氯仿、甲醇、乙醇、叔丁醇、异丙醇和正丁醇中的一种或多种的混合；所述的糖选自乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、海藻糖、绵白糖中的一种或多种；所述阳离子脂质与中性磷脂摩尔比为4~7：3~6；所述中性磷脂为二油酰磷脂酰乙醇胺；所述阳离子脂质为3‑β‑[N‑（N’,N’‑二甲基氨基乙基）]氨甲酰基胆固醇。