一种利用实验室饲养的蜜蜂幼虫培养蜜蜂球囊菌的方法

摘要

本发明提供了一种利用实验室饲养的蜜蜂幼虫培养蜜蜂球囊菌的方法，该方法通过蜜蜂幼虫的实验室饲养，利用蜜蜂球囊菌孢子对蜜蜂接种，并在低温下处理，接种的蜜蜂幼虫可以完成幼虫期的发育。通过这种方式培养蜜蜂球囊菌成功率极高，全部蜜蜂幼虫均可成功的长出蜜蜂球囊菌菌丝，且其生长情况基本一致。本发明的方法省力、有效，可以在短时间内批量获得生长状态基本一致的蜜蜂球囊菌，为相关的研究与实践工作提供了较好的素材与方法。

主权项

一种利用实验室饲养的蜜蜂幼虫培养蜜蜂球囊菌的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）蜜蜂幼虫的实验室饲养：利用24孔板来饲喂蜜蜂的幼虫直至蜜蜂幼虫发育完全；培养箱培育条件温度为34.5℃，湿度≥80%；化蛹后，用滤纸吸干体表的饲料后，置入垫有滤纸的24孔板内完成蛹期的发育；所述饲喂蜜蜂幼虫的饲料配方按重量比为蜂王浆50%，无菌水37%，蜂蜜12%，酵母浸膏1%；（2）接种孢子的准备：接种用的孢子来自于患病蜂群的染病幼虫，采集这些形成孢子的染病幼虫，用匀浆器磨碎幼虫，移至加有灭菌水的烧杯内，加玻璃珠，搅拌4小时以上，制备成接种用的孢子母液；（3）接种：将准备好的孢子母液加入调配好的蜜蜂幼虫的饲料内，使孢子终浓度为104‑106个/毫升；接种的对象为第3‑5日龄的蜜蜂幼虫；接种方法为：在给第3‑5日龄的蜜蜂幼虫更换饲料时，将混有孢子的饲料饲喂蜜蜂24 小时，随后就转为正常的没有孢子的饲料饲喂；（4）低温处理：接种时采用30℃处理4个小时的低温处理，之后转入正常的培养箱内进行饲养。