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斑点吴风草的植株培养方法,其特征在于,该组织培养方法包括无菌处理、分化增殖、壮苗培养、生根培养及炼苗移栽五个步骤,具体步骤如下所示:(1)无菌处理:将斑点吴风草小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上,依次采用浓度为75%的乙醇浸泡20‑30s、1‰的升汞浸泡10‑15min、无菌水冲洗5‑6次并用无菌滤纸吸干表面水分,将小芽基部切成1cm长度后接种于芽诱导培养基上,控制培养温度为24‑26℃,光照为70‑90μmol/ms,进行芽诱导培养;(2)分化增殖:小芽接种于芽诱导培养基上3周后开始膨大并出现黄绿色突起,再培养2周后小芽长势明显,继续培养1个月,切下带芽愈伤组织接种于增殖培养基中,控制培养温度为24‑26℃,光照为70‑90μmol/ms,进行增殖培养;(3)壮苗培养:在增殖培养基中诱导出丛生芽,每丛有2‑3株可以伸长,将其分成小丛或单芽后,放入壮苗培养基中,控制培养温度为24‑26℃,光照为70‑90μmol/ms,进行壮苗培养,20天后可以长到2‑3cm;(4)生根培养:将壮苗培养基中的植株转接入生根培养基中控制培养温度为24‑26℃,光照为70‑90μmol/ms,进行生根培养,10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基20天后出现众多须根;(5)炼苗移栽:生根培养25‑30天,根系长至1‑2cm,选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天,取出后洗净根部琼脂并在温室中继续驯化40‑50天,将其可移栽室外即可。 |