一种细胞表面展示磷脂酶D酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法

摘要

本发明涉及一种细胞表面展示磷脂酶D酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法，步骤为：将全细胞催化剂加入含有丝氨酸、CaCl2、Triton-X100的醋酸缓冲液中，与含有卵磷脂的氯仿溶液混合均匀，在30℃下混合得到均匀的乳状液反应5-6小时；反应结束后静止自然分层，提取有机相；有机溶剂挥发后剩余物经氯仿洗涤两次，即可得到磷脂酰丝氨酸。本发明利用磷脂酶D的高度专一性，催化卵磷脂和丝氨酸生成磷脂酰丝氨酸，且全细胞催化剂具有固定化酶的优点，可重复使用，有效解决了目前提浸法和化学合成法存在的问题，制备工艺简单，适合工业化生产。

主权项

一种细胞表面展示磷脂酶D酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将酵母全细胞催化剂加入含有丝氨酸、CaCl2、Triton‑X100的醋酸缓冲液中，与含有卵磷脂的氯仿溶液等体积混合均匀，在30℃下混合得到均匀的乳状液反应5‑6小时；其中全细胞催化剂为1g、丝氨酸的浓度为4.5M、CaCl2的浓度为5.0mM、Triton‑X100的浓度为0.4％、卵磷脂的浓度为20mM；(2)反应结束后静止自然分层，提取有机相；(3)有机溶剂挥发后剩余物经氯仿洗涤2‑4次，即可得到磷脂酰丝氨酸。