右旋糖酐酶组成型表达工程菌的构建方法及酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种右旋糖酐酶的组成型表达工程菌株构建方法及其制备方法。组成型表达工程菌株的构建方法，包括步骤：（1）将得到的基因插入到表达载体pGAPZαA多克隆位点，构建重组质粒pGAPZαA-dex；（2）将重组质粒线性化转化到毕赤酵母KM71H，筛选出阳性克隆菌。将工程菌用于右旋糖酐酶的制备方法中。本发明成功地实现了右旋糖酐酶基因在毕赤酵母中的有效表达，并以廉价碳源为原料，在发酵过程中无需使用易燃易爆的甲醇，消除生产安全隐患，实现右旋糖酐酶的发酵工艺放大，最大限度地降低成本。

主权项

一种右旋糖酐酶的组成型表达工程菌株构建方法，包括如下步骤：1）将右旋糖酐酶基因插入到表达载体pGAPZαA的三磷酸甘油醛脱氢酶（GAP）启动子的下游多克隆位点，构建重组质粒pGAPZαA‑dex；2）将重组质粒pGAPZαA‑dex线性化，转化到毕赤酵母KM71H，涂板培养，筛选阳性克隆菌KM71H‑dex。