一种马来酰化壳聚糖微球固定化脲酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种马来酰化壳聚糖聚合物微球固定化脲酶的方法，该方法属于生物工程技术领域，其方法是：向烧瓶中加入油相溶剂、少量乳化剂和单体，调节转速，升温至65℃，0.5h后，加入马来酰化壳聚糖水溶液、脲酶-磷酸盐缓冲溶液、过硫酸铵引发剂，并升温至75℃搅拌均匀后，再加入水溶性交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺，反应1～6h。将产物冷却至室温后，先用油相溶剂洗涤3次，除去未反应的反应物及副产物，再用梯度洗脱的方法用无水乙醇或丙酮洗3次，得到固定化脲酶的聚合物微球。本发明制备固定化脲酶聚合物微球的方法，无需去除模板，操作简便，可最大限度地保留包埋物的活性，具有广泛的应用前景和实用价值。

主权项

一种马来酰化壳聚糖微球固定化脲酶的制备方法，其方法步骤是：（1）向烧瓶容器中加入一定配比的乳化剂、油相溶剂和单体，室温搅拌，使单体充分溶解，组成油相；（2）将一定配比的脲酶、引发剂和马来酰化壳聚糖溶解到水中组成水相；（3）在65℃下将水相缓慢滴加至油相中，并升温到75℃，最后加入一定配比的水溶性交联剂N, N‑亚甲基双丙烯酰胺，恒温反应1～6h；（4）反应完毕后，降至室温，先用油相溶剂洗涤3次，除去未反应的反应物及副产物，再用梯度洗脱法用无水乙醇或丙酮洗3次，得到微球。