一种通过游离小孢子培养获得鸭茅单倍体植株的方法

摘要

本发明公开了一种通过组织培养获得鸭茅幼苗的方法。该方法包括如下步骤：组织培养鸭茅的小孢子，得到鸭茅幼苗。在杂交育种中，由于杂种后代遗传组成高度杂合，性状不断分离，要得到一个稳定的品系往往需要多年时间，耗费大量的人力物力。本发明方法可以获得具有纯合遗传背景的鸭茅植株(品系)，固定优良外源基因，固定属间杂种优势，创造丰富的变异类型，提高选择效率。本发明组织培养鸭茅小孢子获得鸭茅幼苗的方法，成胚率高、成苗率高，而且获得的鸭茅单倍体幼苗的纯度高。另外，本发明方法操作简单、成本低廉。因此，本发明方法在鸭茅的遗传育种中具有广阔的应用前景。

主权项

一种获得鸭茅单倍体植株的方法，包括如下步骤：组织培养鸭茅的小孢子，得到鸭茅单倍体植株；所述小孢子为处于如下发育时期的小孢子：小孢子的细胞核处于单核中期或单核晚期；所述组织培养的方法包括如下步骤：1)培养所述小孢子，得到胚状体；2)培养所述胚状体，得到鸭茅单倍体植株；所述步骤1)中，培养的条件为：温度为20℃‑30℃、黑暗和培养时间为20天‑30天；所述步骤1)中使用的培养基的组成为：由NH4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、MnSO4·5H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Fe‑Na2·EDTA、谷氨酸、肌醇、维生素B1、麦芽糖、植物凝胶和水组成；NH4NO3在培养基中的浓度为165mg/L，KNO3在培养基中的浓度为1900mg/L，KH2PO4在培养基中的浓度为170mg/L，MgSO4·7H2O在培养基中的浓度为370mg/L，CaCl2·2H2O在培养基中的浓度为440mg/L，MnSO4·5H2O在培养基中的浓度为22.3mg/L，ZnSO4·7H2O在培养基中的浓度为8.6mg/L，H3BO3在培养基中的浓度为6.2mg/L，Na2MoO4·2H2O在培养基中的浓度为0.25mg/L，CuSO4·5H2O在培养基中的浓度为0.025mg/L，CoCl2·6H2O在培养基中的浓度为0.025mg/L，Fe‑Na2·EDTA在培养基中的浓度为40mg/L，谷氨酸在培养基中的浓度为750mg/L，肌醇在培养基中的浓度为100mg/L，维生素B1在培养基中的浓度为0.4mg/L，麦芽糖在培养基中的浓度为62，000mg/L，植物凝胶在培养基中的浓度为3000mg/L；所述步骤2)中，培养的条件为：温度为20℃‑30℃，光照时间为5小时/天‑11小时/天，光照强度为20μmol/m2·s‑80μmol/m2·s；所述步骤2)中使用的培养基的组成为：由NH4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Na2EDTA、FeSO4·7H2O、甘氨酸、蔗糖、琼脂和水组成；NH4NO3在培养基中的浓度为1650mg/L，KNO3在培养基中的浓度为1900mg/L，KH2PO4在培养基中的浓度为170mg/L，MgSO4·7H2O在培养基中的浓度为370mg/L，CaCl2·2H2O在培养基中的浓度为440mg/L，MnSO4·4H2O在培养基中的浓度为22.3mg/L，ZnSO4·7H2O在培养基中的浓度为8.6mg/L，H3BO3在培养基中的浓度为6.2mg/L，KI在培养基中的浓度为0.83mg/L，Na2MoO4·2H2O在培养基中的浓度为0.25mg/L，CuSO4·5H2O在培养基中的浓度为0.025mg/L，CoCl2·6H2O在培养基中的浓度为0.025mg/L，Na2EDTA在培养基中的浓度为37.25mg/L，FeSO4·7H2O在培养基中的浓度为27.85mg/L，甘氨酸在培养基中的浓度为2mg/L，蔗糖在培养基中的浓度为30,000mg/L，琼脂在培养基中的浓度为8000mg/L。