一种利用鱿鱼肝脏蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的方法

摘要

本发明涉及一种利用鱿鱼肝脏蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的方法，包括将提取鱼油后的鱿鱼肝脏蛋白用丙酮处理除脂，选用胃蛋白酶在在水解温度35～38℃，pH为1.5～2.5，酶与底物的比为2～3％，底物浓度为1～3％条件下水解鱿鱼肝脏蛋白18～25h；将酶解液进行超滤处理后，跟踪其ACE抑制活性，应用凝胶过滤层析、DEAE阴离胃子交换、RP-HPLC等方法分离纯化ACE抑制肽，制得的ACE抑制肽在温度2～100℃、pH值1～12之间对ACE的抑制活性基本没有变化，比较稳定，而且模拟胃肠消化实验对组分的ACE抑制活性的影响不大，经过胃肠消化后仍具有较高的ACE抑制活性。本方法不仅工艺合理，易操作，而且减少了废物排放，变废为宝，制得的ACE抑制肽可应用于开发具有降血压功能食品及医药领域。

主权项

一种利用鱿鱼肝脏蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的方法，其特征在于包括以下步骤：1)采取丙酮浸提法提取鱿鱼肝脏蛋白：将鱿鱼肝脏与水按质量比1∶1～1∶1.5混合，充入氮气10～20分钟，加入占鱿鱼肝脏重量0.1～0.5％的L‑抗坏血酸‑6‑棕榈酸酯抗氧剂，放入高压锅中处理20～30min，离心处理，除去上层鱼油，用丙酮洗涤数次，将组织脱水制成丙酮粉，真空干燥即得脱脂鱿鱼肝脏蛋白；2)用胃蛋白酶酶解鱿鱼肝脏蛋白：以脱脂鱿鱼肝脏蛋白为底物，在水解温度35～38℃，pH为1.5‑2.5，酶与底物的比为2～3％，底物浓度为1～3％条件下水解鱿鱼肝脏蛋白18～25h，其中百分比为质量百分比；3)将得到的鱿鱼肝脏蛋白酶解液进行超滤处理；4)将超滤后的产物用Sephadex G‑50凝胶柱初步分离，得到粗分物的ACE抑制肽；5)在粗分物的ACE抑制肽中选取活性高的组分用DEAE阴离子交换柱进行分离纯化；6)将纯化后得到的活性高的组分用Sephadex LH‑20继续分离纯化；7)最后检测纯度，得到血管紧张素转换酶抑制肽。