用于缩短杂交分析中的培养时间的方法和试剂

摘要

在此描述的方法和试剂可用于缩短杂交分析中的培养时间。如实施例中说明的，我们已经确定导致培养时间显著缩短(例如三小时之后的信号(signal)可与传统仅可在培养一夜之后获得的信号堪相比较)的特殊磺酸聚合物和杂交条件。在一些实施方案中，通过在杂交方法期间添加一种或多种磺酸聚合物获得更短的培养时间。可选地或另外地，在一些实施方案中，通过改变杂交条件，例如通过降低杂交体积，增加盐浓度，和/或增加探针浓度(捕获扩展物探针和/或标记扩展物探针)来获得更短的培养时间。

主权项

1.用于检测包括第一和第二核酸序列的目标核酸的溶液核酸杂交分析方法，包括：(a) 在杂交条件下使目标核酸接触磺酸聚合物或其盐以及过量的(i)包括第一和第二区段的标记扩展物探针，其中第一区段与目标核酸的第一核酸序列互补和(ii)包括第一和第二区段的捕获扩展物探针，其中第一区段与目标核酸的第二核酸序列互补；(b) 在杂交条件下使步骤(a)的产物与结合至与所述捕获扩展物探针的第二区段互补的固相的捕获探针接触；(c) 去除未结合至该固相的材料；(d) 在杂交条件下使步骤(c)的固相复合产物接触核酸多聚体，所述核酸多聚体包括(i)与标记扩展物探针的第二区段互补的预扩增探针和(ii)许多扩增探针；(e) 去除未结合的核酸多聚体；(f) 在杂交条件下使步骤(e)的固相复合产物接触与该核酸多聚体的扩增探针互补的标记的低聚核苷酸；(g) 去除未结合的标记的低聚核苷酸；和(h) 检测步骤(g)的固相复合产物中标记的低聚核苷酸的存在，其中步骤(a)中的磺酸聚合物或其盐具有通式(I)或(II)：或是其盐，其中：R¹为氢或C_1-6脂族基团；L为共价键或C_1-6亚烷基；R³为氢或C_1-6烷基；和 n为大于10的整数。