一种评估药物对hERG作用而引起心律失常的试验方法

摘要

一种评估药物对hERG作用而引起心率失常的试验方法，其特征在于：按常规把细胞去极化激活hERG离子通道，然后把细钳回到以记录通道的失活过程，记录到所要记录的hERG离子通道电流幅度；进行电压钳流程试验，获取药物脱离通道的速度；用IC50150ms/IC50500ms和IC50150ms/IC502S来计算500ms和2s时化合物hERG离子通道的时间依赖性；比值越大说明它的时间依赖性越大；在确认药物在阻塞hERG离子通道试验中具有明显时间依赖性的前提下，运用RRec＝(IC150ms-2-IC502S)/(IC150150ms-IC502S)计算出该药物hERG阻断剂的回复时间指数，依回复时间指数小于25的药物确认为具有较大诱发TdP的可能性药物。

主权项

一种评估药物对hERG作用而引起的心率失常的试验方法，包括体外细胞模型通道分析、离体心脏组织检测和器官水平/整体动物三个流程，其特征在于：a)按常规把细胞去极化至40mv/5ms来激活hERG离子通道，然后把细胞钳回到‑50mv/s以记录通道的失活过程，在‑50mv记录到的最大电流即为所要记录的hERG离子通道电流幅度；b)进行下列电压钳流程试验，获取药物脱离通道的速度；该试验包含2段2秒的两次去极化脉冲激化过程；脉冲将细胞去极化至20mv，两个脉冲去极化之间，细胞被钳回至‑80mv共1秒钟，应用在第一次2秒钟的去极化中，比较不同时间的药物阻断程度就能估算出药物阻断hERG离子通道的时间依赖性，，在第二次去极化中测出150ms后的“再阻断”强度，然后将其与第一次去极化末端获得的阻断强度进行比较，就能得到药物脱离通道的速度；c)用IC50150ms/IC50500ms和IC50150ms/IC502s来计算500ms和2s时化合物hERG离子通道的时间依赖性；比值越大说明它的时间依赖性越大；d)在确认药物在阻塞hERG离子通道试验中具有明显时间依赖性的前提下，运用RRec＝(IC150ms‑2‑IC502s)/(IC150150ms‑IC502s)计算出该药物hERG阻断剂的回复时间指数，依回复时间指数小于25的药物确认为具有较大诱发TdP的可能性药物。